AGEs對(duì)大鼠淚腺上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激及NF-κB活性的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：以體外培養(yǎng)的大鼠淚腺上皮細(xì)胞為模型，自制糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)，觀察AGEs對(duì)大鼠淚腺上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激及NF-kB活性的影響。 方法： 1.采用酶消化法培養(yǎng)原代大鼠淚腺上皮細(xì)胞。 2.糖孵育法制備牛血清白蛋白的AGEs。 3.以不同濃度的AGEs(12.5、25、50、100、2001ag/ml)與淚腺上皮細(xì)胞作用48小時(shí)，再選取敏感濃度組100μg/ml AGEs分別作用淚腺上皮細(xì)胞12、24

2、、48小時(shí)，用分光光度法測(cè)量細(xì)胞內(nèi)丙二醛含量(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活力，western blot法檢測(cè)胞核NF-κBp65蛋白的表達(dá)。 結(jié)果： 1.所培養(yǎng)的第2代大鼠淚腺上皮細(xì)胞純度可達(dá)85％以上。 2.熒光分光光度法鑒定AGEs-BSA的熒光值：PBS調(diào)零，激發(fā)波長(zhǎng)390nm，發(fā)射波長(zhǎng)450nm，峰狹5nm。 3.AGEs以濃度和時(shí)間依賴性增加淚腺上皮細(xì)胞內(nèi)丙二醛含量，同時(shí)降低超氧化物歧化

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