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1、目的:研究黃芩苷對(duì)兔晶狀體上皮細(xì)胞增殖及對(duì)NF-κB表達(dá)的影響,初步探討黃芩苷對(duì)減輕后囊混濁的作用,為后囊膜混濁的藥物治療開(kāi)辟一條新的途徑。
方法:⑴兔晶狀體上皮細(xì)胞的原代培養(yǎng)及傳代:將健康無(wú)眼疾成年家兔靜脈空氣栓塞處死后,取眼球,截取前囊膜剪成1mm×1mm大小的碎片接種于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),Ⅰ型膠原酶消化,每2-3天換液一次,約2周后細(xì)胞可長(zhǎng)滿(mǎn)大部分瓶底。用0.25%胰酶消化后1:2傳代,選用2-3代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。⑵設(shè)立不同濃度
2、、不同作用時(shí)間的藥物組及空白對(duì)照組。⑶MTT法檢測(cè)各時(shí)間各濃度藥物對(duì)兔晶狀體上皮細(xì)胞的抑制率。⑷流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定作用48h各濃度組細(xì)胞早期凋亡率。⑸半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)不同濃度黃芩苷作用兔晶狀體上皮細(xì)胞中NF-κBp65亞基的表達(dá)。
結(jié)果:①M(fèi)TT結(jié)果顯示黃芩苷能抑制兔晶狀體上皮細(xì)胞的增殖,抑制率與時(shí)間、濃度呈正相關(guān)。48小時(shí)半數(shù)抑制濃度為46.32μg/ml。②流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)證實(shí)黃芩苷能有效誘導(dǎo)
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