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1、稻米資源中蘊(yùn)含豐富的生物活性物質(zhì),具有良好的抗氧化、降血壓和提高免疫力的功效。大米活性肽(RBP)可根據(jù)其功能效應(yīng)分為大米抗氧化肽、大米降血壓肽、大米風(fēng)味肽、大米免疫活性肽和阿片活性肽等。本課題組一直潛心于研究大米活性肽的抗氧化功能及作用機(jī)理,在前期的研究中發(fā)現(xiàn),大米活性肽在過(guò)氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)的人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)氧化應(yīng)激中有良好的抑制效果,這不僅體現(xiàn)在細(xì)胞水平,在蛋白水平也出現(xiàn)明顯的差異。因此我們推測(cè),大米活性肽可
2、以通過(guò)刺激某些信號(hào)通路的調(diào)控,達(dá)到抑制氧化應(yīng)激的效果。本論文介紹了血管內(nèi)皮細(xì)胞常見(jiàn)的損傷機(jī)制,不同損傷機(jī)制分別涉及的信號(hào)通路,重點(diǎn)介紹了氧化損傷應(yīng)激相關(guān)信號(hào)通路。在此基礎(chǔ)上,通過(guò)70μmol/L H2O2損傷HUVEC,經(jīng)0.2 mg/mL RBP預(yù)處理24小時(shí)后,通過(guò)Western blot檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)凋亡因子NF-κB、p38MAPK、IKKβ激活前后在H2O2氧化應(yīng)激損傷以及大米活性肽保護(hù)前后的表達(dá)變化,以此探究RBP對(duì)氧
3、化損傷內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路的影響。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,H2O2損傷組(70mol/L)NF-κB蛋白、p-NF-κB蛋白、p38MAPK蛋白、p-p38MAPK蛋白、IKKβ蛋白、p-IKKβ蛋白的表達(dá)量與空白對(duì)照組比較顯著上升。經(jīng)0.2 mg/mL大米活性肽預(yù)處理24小時(shí)后,各組NF-κB蛋白、p38MAPK蛋白、p-p38MAPK蛋白、IKKβ蛋白表達(dá)量與H2O2損傷組(70μmol/L)明顯減少;H2O2損傷組(70μ
4、mol/L)與RBP保護(hù)組細(xì)胞p-NF-κB蛋白表達(dá)水平差異不大;RBP保護(hù)組細(xì)胞p-IKKβ蛋白的表達(dá)量多于H2O2損傷組(70μmol/L)細(xì)胞p-IKKβ蛋白的表達(dá)量。
研究結(jié)果表明,大米活性肽對(duì)氧化損傷內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)機(jī)制與下調(diào)NF-κB信號(hào)通路上NF-κB蛋白、p38MAPK蛋白、p-p38MAPK蛋白、IKKβ蛋白的表達(dá)密切相關(guān),通過(guò)抑制相關(guān)凋亡因子的表達(dá)來(lái)調(diào)控人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞抗氧化損傷能力,從而對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞起到
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