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文檔簡(jiǎn)介
1、水稻(Oryza sativa L.)是我國(guó)和全世界最重要的糧食作物之一,是世界一半以上人口的主食,也是重要的功能基因研究的模式植物之一。與其相關(guān)的遺傳學(xué)和分子生物學(xué)研究一直倍受研究者的重視,轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控是基因表達(dá)調(diào)控的重要方式。植物MYB轉(zhuǎn)錄因子家族成員功能多樣、數(shù)量眾多,參與調(diào)控植物發(fā)育、代謝和對(duì)生物與非生物脅迫的反應(yīng)等多種生理過(guò)程。本研究利用已知水稻基因組序列,以水稻品種日本晴cDNA為模版克隆了MYB家族基因TF865,采用G
2、ATEWAY系統(tǒng)分別構(gòu)建了TF865基因融合VP64轉(zhuǎn)錄激活基序的表達(dá)載體(CV865)和融合轉(zhuǎn)錄抑制基序EAR的表達(dá)載體(CE865),并通過(guò)遺傳轉(zhuǎn)化獲得以水稻Kita-ake為背景的轉(zhuǎn)基因植株。通過(guò)對(duì)CV865和CE865載體陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因植株的研究獲得以下主要結(jié)果:
1.在三葉一心期和成熟期的株高調(diào)查結(jié)果顯示,CV865轉(zhuǎn)基因植株株高降低,而CE865轉(zhuǎn)基因植株株高增加,表明TF865轉(zhuǎn)錄因子參與水稻株高調(diào)控。節(jié)間縱向解剖切
3、片觀察發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)基因材料與WT對(duì)照相比其細(xì)胞個(gè)數(shù)沒有明顯變化,而細(xì)胞長(zhǎng)度變化明顯,暗示TF865轉(zhuǎn)錄因子基因可能參與細(xì)胞伸長(zhǎng)調(diào)控。
2.CV865對(duì)植株開花時(shí)間沒有明顯影響, CE865顯著延遲開花時(shí)間;CV865與CE865轉(zhuǎn)基因植株的分蘗數(shù)都明顯降低,但CE865植株的一級(jí)枝梗數(shù)顯著增加,導(dǎo)致單株產(chǎn)量增加。
3.對(duì)CV865和CE865轉(zhuǎn)基因植株與野生型對(duì)照進(jìn)行表達(dá)譜測(cè)序分析,發(fā)現(xiàn):CV865植株上調(diào)基因778個(gè);
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