水稻OsWRKY10轉(zhuǎn)錄因子的功能初析.pdf

1、 從水稻T-DNA插入突變體庫(kù)中篩選到一個(gè)生育期延遲突變體，該突變體主要表現(xiàn)為生育期延遲、植株矮化、葉色變深、葉角張大、根系變短。遺傳分析表明該突變體受一對(duì)隱性單基因控制。對(duì)突變體及其后代分離群體及雜交后代做Basta抗性檢測(cè)，證實(shí)該突變體是由T-DNA插入引起的，突變性狀與T-DNA共分離。并通過(guò)PCR和Southern雜交結(jié)果得到進(jìn)一步驗(yàn)證。 通過(guò)Tail-PCR的方法，己克隆到與此突變性狀相關(guān)的基因，與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)

2、比對(duì)后發(fā)現(xiàn)該基因序列與GenBank庫(kù)中水稻第1染色體2個(gè)相互重疊的PAC克隆AP002744和AP002839具有高度的同源性，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)T-DNA插入到WRKY家族轉(zhuǎn)錄因子OsWRKY10的5'-UTR中，命名為OsWRKY10。 植物WRKY基因編碼的轉(zhuǎn)錄因子參與生物與非生物脅迫及發(fā)育等多種生理過(guò)程，為了研究這一超級(jí)轉(zhuǎn)錄因子家族在水稻上的功能，構(gòu)建了包含WRKY保守結(jié)構(gòu)域的dsRNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)干涉載體。 用不同濃