粘附分子、IL-8及其受體在哮喘豚鼠的表達(dá)變化及其對(duì)中性粒細(xì)胞粘附遷移能力的影響研究.pdf

1、目的：研究哮喘豚鼠中P-selectin與其受體L-selectin、IL-8與其受體CXCR1/CXCR2、CD11a與其受體ICAM-1的表達(dá)改變是否影響中性粒細(xì)胞的粘附遷移。
　　方法：沿用我室前期實(shí)驗(yàn)方法構(gòu)建哮喘豚鼠模型，購(gòu)買(mǎi)30只8-10周齡健康雄性豚鼠，隨機(jī)分為3組：對(duì)照組、哮喘組、哮喘治療組(治療組)。收集各組豚鼠BALF、腹主動(dòng)脈血進(jìn)行白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)。ELISA檢測(cè)BALF與血清中IL-8濃度。提取各組豚鼠肺組織，

2、通過(guò)免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)各組豚鼠肺血管內(nèi)皮細(xì)胞上P-selectin、ICAM-1表達(dá)及定位。分離各組豚鼠腹主動(dòng)脈血中性粒細(xì)胞，進(jìn)行后續(xù)血中性粒細(xì)胞上相關(guān)蛋白檢測(cè)：通過(guò)Western blot方法檢測(cè)CXCR1、CXCR2、L-selectin蛋白表達(dá)水平，采用Realtime-PCR方法檢測(cè)CXCR1、CXCR2、L-selectin的mRNA水平，利用Transwell小室檢測(cè)中性粒細(xì)胞的遷移能力，粘附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中性粒細(xì)胞的粘附能力，

3、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD11a的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.各組豚鼠在霧化激發(fā)過(guò)程中的不同反應(yīng)：對(duì)照組豚鼠顯得安然無(wú)恙，無(wú)任何異常癥狀。哮喘組及治療組豚鼠出現(xiàn)典型的哮喘癥狀，如：咳嗽、抓鼻、點(diǎn)頭呼吸、呼吸急促等,且哮喘組癥狀更明顯。2.各組豚鼠BALF及血中中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞比例結(jié)果顯示：哮喘組較對(duì)照組、治療組的中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞比例及數(shù)目均明顯升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。3.各組豚鼠血中性粒細(xì)胞CXCR1、CXCR

4、2、L-selectin的蛋白表達(dá)結(jié)果顯示：哮喘組較對(duì)照組、治療組表達(dá)均明顯增多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。4.各組豚鼠血清及BALF中IL-8表達(dá)結(jié)果顯示：哮喘組較對(duì)照組、治療組表達(dá)均明顯增多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。5.各組豚鼠血中性粒細(xì)胞CXCR1、CXCR2、L-selectin的mRNA表達(dá)結(jié)果顯示：哮喘組較對(duì)照組、治療組表達(dá)均明顯增多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。6.各組豚鼠肺組織P-selec

5、tin、ICAM-1免疫組化結(jié)果顯示：哮喘組較對(duì)照組、治療組表達(dá)均明顯增多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。7.各組豚鼠血中性粒細(xì)胞的遷移能力結(jié)果顯示：哮喘組較對(duì)照組、治療組遷移能力均明顯增強(qiáng)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。8.各組豚鼠血中性粒細(xì)胞粘附能力結(jié)果顯示：哮喘組較對(duì)照組、治療組粘附能力均明顯增強(qiáng)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。9.各組豚鼠血中性粒細(xì)胞上CD11a的表達(dá)結(jié)果顯示：哮喘組較對(duì)照組、治療組表達(dá)均明顯增

6、多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　結(jié)論：1.哮喘豚鼠P-selectin與其受體L-selectin、IL-8與其受體CXCR1/CXCR2、CD11a與其受體ICAM-1的表達(dá)均明顯增多。
　　2.L-selectin、P-selectin、ICAM-1、CD11a、CXCR1、CXCR2、IL-8的表達(dá)上調(diào)可增強(qiáng)中性粒細(xì)胞的粘附遷移能力。3.哮喘豚鼠氣道中性粒細(xì)胞的增多可能是通過(guò)以上粘附分子、趨化因子及其受體