晚期糖基化終產(chǎn)物及其受體(AGE-RAGE)通過線粒體途徑誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌細胞增殖.pdf

1、目的：
　　探討晚期糖基化終產(chǎn)物及其受體（AGE/RAGE）對子宮內(nèi)膜癌細胞增殖及能量代謝的作用及機制。
　　方法：
　　利用免疫組化的方法檢測子宮內(nèi)膜樣腺癌(endometrial carcinoma)組織及正常內(nèi)膜(normal endometrial)組織中AGE與RAGE的表達;以子宮內(nèi)膜癌細胞系HEC-1A為研究對象，構(gòu)建質(zhì)粒pcDNA3.1-Myc-RAGE-△CT，轉(zhuǎn)染篩選出穩(wěn)定表達的克隆株HEC-1A-

2、△CT;流式細胞儀檢測轉(zhuǎn)染前后細胞內(nèi)活性氧(ROS)及膜電位的變化(△ψm);westren blot檢測轉(zhuǎn)染前后細胞系中smac，bax及bcl-2的蛋白含量;利用ELISA方法檢測轉(zhuǎn)染前后細胞系中丙酮酸激酶(PK)及異檸檬酸脫氫酶(IDH)的含量變化。
　　結(jié)果：
　　AGE/RAGE在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的表達明顯高于正常內(nèi)膜組織(X^2=16.854，P＜0.05，X^2=25.357，P＜0.05); AGE與RA

3、GE呈明顯的正相關(guān)(RS=0.38，P=0.038);未轉(zhuǎn)染組中加入AGE-BSA組與加入BSA組細胞內(nèi)活性氧(ROS)含量明顯降低（2522.75±437.05，7138.00±245.84，P=0.001），轉(zhuǎn)染組與轉(zhuǎn)染組相比細胞內(nèi)活性氧(ROS)含量升高(2522.75±437.05，3483.00±111.07，P=0.007)并且膜電位的變化(△ψm)在未轉(zhuǎn)染組中加入AGE-BSA比加入BSA組也明顯較對照組降低(P＜0.05

4、)，轉(zhuǎn)染組與轉(zhuǎn)染前相比膜電位變化升高;westren blot顯示smac及bax蛋白含量在未轉(zhuǎn)染組中降低，在轉(zhuǎn)染組中升高，并且加入AGE-BSA后含量降低，bcl-2含量在未轉(zhuǎn)染組中升高，在轉(zhuǎn)染組中降低，并且加入AGE-BSA后含量升高;ELISA結(jié)果未轉(zhuǎn)染組中加入AGE-BSA組與加入BSA組中PK與IDH水平明顯升高（PK:35.86±3.69，24.63±3.85，P=0.007;IDH:209.5±45.77，155.95±4

5、6.13，P=0.021），轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-Myc-RAGE-△CT后與轉(zhuǎn)染前相比PK與IDH降低(PK:35.86±3.69，18.14±4.35，P=0.001; IDH:209.5±45.77，110.83±16.19, P=0.001)。
　　結(jié)論：
　　AGE/RAGE在子宮內(nèi)膜癌中高表達，AGE/RAGE與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，有可能通過降低細胞內(nèi)活性氧含量、調(diào)節(jié)膜電位變化、抑制線粒體凋亡及增強糖代