晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGES）通過(guò)NF-κB途徑影響表皮角質(zhì)形成細(xì)胞功能.pdf

1、本研究以晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGES)為切入點(diǎn)，通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑來(lái)研究DM狀態(tài)下表皮角質(zhì)形成細(xì)胞生物學(xué)功能的改變?！　》椒w內(nèi)部分：運(yùn)用STZ誘導(dǎo)晚期DM大鼠模型，每星期測(cè)量大鼠的體重、血糖；檢測(cè)表皮層中NF-κB活性和AGES的表達(dá)；檢測(cè)表皮角質(zhì)形成細(xì)胞釋放的表皮生長(zhǎng)因子(EGF)；檢測(cè)試劑盒檢測(cè)凋亡率的改變；檢測(cè)表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的遷移功能；探討核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在DM大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞中的活化狀態(tài)。

2、 體外部分：選用清潔級(jí)SD大鼠背部表皮角質(zhì)形成細(xì)胞做細(xì)胞原代培養(yǎng)，并使用一定濃度的AGES進(jìn)行干預(yù)，胎盤(pán)蘭實(shí)驗(yàn)檢測(cè)活細(xì)胞貼壁率；通過(guò)倒置顯微鏡觀察在不同時(shí)相點(diǎn)表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變；通過(guò)透射電鏡觀察表皮角質(zhì)形成細(xì)胞結(jié)構(gòu)的改變；檢驗(yàn)細(xì)胞的相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力；檢測(cè)被干預(yù)細(xì)胞周期的改變；檢測(cè)被干預(yù)細(xì)胞凋亡率的變化；檢測(cè)表皮角質(zhì)形成細(xì)胞對(duì)EGF的利用；觀察表皮角質(zhì)形成細(xì)胞中NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的活化狀態(tài)?！　∫陨象w內(nèi)、體外試驗(yàn)均證實(shí)A