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1、本研究以晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGES)為切入點,通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑來研究DM狀態(tài)下表皮角質(zhì)形成細胞生物學(xué)功能的改變?! 》椒w內(nèi)部分:運用STZ誘導(dǎo)晚期DM大鼠模型,每星期測量大鼠的體重、血糖;檢測表皮層中NF-κB活性和AGES的表達;檢測表皮角質(zhì)形成細胞釋放的表皮生長因子(EGF);檢測試劑盒檢測凋亡率的改變;檢測表皮角質(zhì)形成細胞的遷移功能;探討核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在DM大鼠表皮角質(zhì)形成細胞中的活化狀態(tài)。
2、 體外部分:選用清潔級SD大鼠背部表皮角質(zhì)形成細胞做細胞原代培養(yǎng),并使用一定濃度的AGES進行干預(yù),胎盤蘭實驗檢測活細胞貼壁率;通過倒置顯微鏡觀察在不同時相點表皮角質(zhì)形成細胞的形態(tài)學(xué)改變;通過透射電鏡觀察表皮角質(zhì)形成細胞結(jié)構(gòu)的改變;檢驗細胞的相對數(shù)和相對活力;檢測被干預(yù)細胞周期的改變;檢測被干預(yù)細胞凋亡率的變化;檢測表皮角質(zhì)形成細胞對EGF的利用;觀察表皮角質(zhì)形成細胞中NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的活化狀態(tài)?! ∫陨象w內(nèi)、體外試驗均證實A
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