乳黃制劑對肝硬化模型大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)的影響.pdf

1、目的：晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)是指蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或核酸等大分子在沒有酶參與的條件下，自發(fā)地與葡萄糖或其他還原單糖反應(yīng)所生成的穩(wěn)定的共價化合物。近來研究認(rèn)為肝臟在AGEs的代謝中起主要作用。其中肝硬化與AGEs關(guān)系密切，肝硬化患者血清AGEs水平是升高的。其發(fā)生機(jī)制在于：一方面，肝臟是AGEs主要的代謝部位，肝硬化時伴隨的氧應(yīng)激及內(nèi)毒素血癥、肝腎功能不全等可促進(jìn)AGEs的產(chǎn)生和(或)抑制其降解；另一方面，血液和肝組織內(nèi)AGEs增加可通

2、過促進(jìn)肝臟的氧化應(yīng)激/脂質(zhì)過氧化損傷、炎癥反應(yīng)以及肝纖維化等途徑，誘發(fā)或加重肝臟損傷。肝硬化時普遍存在的腸源性內(nèi)毒素血癥(IETM)可能有助于AGEs的形成，因為內(nèi)毒素可以通過激活單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用，單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)包括單核細(xì)胞和枯否細(xì)胞，被脂多糖(LPS)激活后，可表達(dá)、分泌各種細(xì)胞因子和炎性介質(zhì)，如腫瘤壞死因子—a(TNF—a)、白細(xì)胞介素(IL-1、IL-6、IL-8)、白三烯(LTs)、血小板活化因子(PAF)，

3、氧自由基、一氧化氮(NO)以及內(nèi)皮素(ET-1)等，這些介質(zhì)構(gòu)成一個獨(dú)特的網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，共同參與對肝組織及其它器官損傷，乃至出現(xiàn)多器官衰竭。這也可能與內(nèi)毒素誘導(dǎo)氧應(yīng)激，從而增加AGEs形成有關(guān)。降低或抑制AGEs水平，可以減少氧應(yīng)激和促進(jìn)炎癥反應(yīng)，緩解肝纖維化程度。而治療內(nèi)毒素血癥，抑制內(nèi)毒素的生成和對內(nèi)毒素進(jìn)行清除，減少氧應(yīng)激，可以降低AGEs水平，減輕肝損傷，有利于肝硬化程度的好轉(zhuǎn)。乳黃制劑是國家名老中醫(yī)張赤志教授根據(jù)中醫(yī)理論和臨床經(jīng)驗

4、總結(jié)出治療肝性腦病的中藥制劑，在前期防治急性肝性腦病和肝硬化IETM中的實驗研究中發(fā)現(xiàn)乳黃制劑能降低血清內(nèi)毒素水平，為了進(jìn)一步研究該制劑對肝硬化模型大鼠AGEs的影響，我們將從細(xì)胞分子水平進(jìn)行探討，為肝硬化的防治提供新的理論依據(jù)。 方法：SPF級雄性Wister大鼠88只,體重200～250克，隨機(jī)分為6組：正常組、模型組、預(yù)防組、預(yù)防對照組、模型治療組、模型治療對照組。除正常組外，其余各組均采用CCL4復(fù)合因素法制造肝硬化模型

5、，飼養(yǎng)10周。正常組、模型組生理鹽水1ml/100g灌胃；預(yù)防組、預(yù)防對照組在造模同時分別給予乳黃制劑、乳果糖2ml/d灌胃；造模第9周開始模型治療組、模型治療對照組分別給予乳黃制劑、乳果糖2ml/d灌胃連續(xù)2周。第10周末處死大鼠取材。(1)酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)定量測定大鼠肝組織勻漿AGEs含量(2)在無熱源條件下采右心室血5ml檢測血清ALT、AST、ALB、TP、TBil含量；(3)取肝左葉作病檢。 結(jié)果：(1)乳

6、黃制劑可明顯降低肝硬化大鼠AGEs含量水平(P＜0.05)；(2)乳黃制劑可明顯降低肝硬化大鼠血清ALT、AST、TBil水平(P＜0.05)尤以預(yù)防組效果明顯；(3)乳黃制劑能改善預(yù)防組和模型治療組肝組織的肝硬化以及纖維組織增生、炎性細(xì)胞浸潤程度，其中預(yù)防組肝組織的病理變化改善明顯。 結(jié)論：乳黃制劑能有效降低肝組織中AGEs的水平，有利于肝功能的改善，肝硬化程度的好轉(zhuǎn)，可能有下列機(jī)制實現(xiàn)：①乳黃制劑通過減少內(nèi)毒素的生成，促進(jìn)肝