雨生紅球藻的紫外誘變、抗銨品系篩選及培養(yǎng)條件優(yōu)化.pdf

1、蝦青素是一種具有強抗氧化能力的色素，被廣泛應用于醫(yī)藥、化妝品及飼料添加劑等領域。雨生紅球藻（Haematococcus pluvialis）在不利條件下能夠積累大量蝦青素，是目前已知的自然界中天然蝦青素含量最高的生物，是獲取天然蝦青素的理想來源，選取適合大規(guī)模培養(yǎng)的雨生紅球藻藻株成為近年來該領域的研究熱點之一。
　　 在培養(yǎng)過程中主要存在以下問題：首先，雨生紅球藻的生長周期長，生長緩慢；其次，培養(yǎng)過程中易受到敵害生物的污染。

2、r>　　 本實驗以野生型雨生紅球藻為出發(fā)株，經過單細胞分離篩選出一株生長速率快的藻株，使用紫外線處理篩選出的雨生紅球藻藻株。根據(jù)實驗結果確定適合的誘變時間為5min，以400㎎/L的NH4HCO3作為篩選條件，在此條件下，輪蟲等敵害生物無法生存，經篩選得到可以在含有NH4HCO3的濃度為400㎎/L的培養(yǎng)基中正常生長并且生長速率快的誘變株。
　　 本實驗探討了雨生紅球藻野生型及抗銨品系誘變株誘導積累蝦青素的條件。通過研究光照、

3、NaNO3濃度、NaCl濃度及溫度對兩種品系雨生紅球藻蝦青素積累誘導作用的單因子實驗，得到適宜藻體積累蝦青素的光照、NaNO3濃度、NaCl濃度、溫度的范圍。根據(jù)單因子實驗進行四因素三水平的正交實驗，得到兩種品系適宜蝦青素積累的條件組合均為：光照200μmol·m-2·s-1，NaNO30mol㎎/L，NaCl2g/L，溫度27℃。
　　 本實驗研究了培養(yǎng)基組成及培養(yǎng)條件對雨生紅球藻野生型及抗銨品系誘變株生長的影響。通過研究培養(yǎng)

4、基中NaNO3、KH2PO4、FeCl3·6H2O的濃度及溫度、光照、pH的大小對兩種品系雨生紅球藻生長影響的單因子實驗，得到適宜藻細胞生長的各因子范圍，然后分別進行三因子三水平的正交實驗，得到的兩品系優(yōu)化后的培養(yǎng)基有所差異，野生型雨生紅球藻生長的最適條件為NaNO3500㎎/L，KH2PO4100㎎/L，F(xiàn)eCl3·6H2O1.0㎎/L，溫度18℃，光照強度1001μmol·m-2`·S-1，pH8；誘變株生長的最適條件為：NaNO3