高產(chǎn)蝦青素雨生紅球藻的選育及光譜特性分析.pdf

1、蝦青素是一種高附加值的酮式類胡蘿卜素，在水產(chǎn)、醫(yī)藥、食品和化妝品等領(lǐng)域有廣闊的市場(chǎng)前景。雨生紅球藻在不利環(huán)境下可積累大量蝦青素。本研究采用誘變育種技術(shù)，篩選高產(chǎn)蝦青素的突變?cè)逯?。主要?nèi)容如下： ㈠實(shí)驗(yàn)中使用紫外線(UV)、甲基磺酸乙酯（EMS）、亞硝基胍(NTG)為誘變劑；β-紫羅酮、煙堿為篩選劑?？刂埔欢?xì)胞濃度（OD674=0.030～0.035），根據(jù)致死率達(dá)到85％～90％的原則，確定適宜的濃度分別為：UV照射28mi

2、n、NTG3.67×10-3 moL/L、EMS0.41moL/L；β-紫羅酮2.8×10-4 mol/L、煙堿9.6×10-4 mol/L。經(jīng)過單因素誘變，篩選出四株較優(yōu)單因素突變株：UV-N2 蝦青素產(chǎn)量和含量分別提高27.1％和14.4％；UV-β5蝦青素產(chǎn)量和含量分別提高29.4％和35.2％；EMS-N5蝦青素產(chǎn)量和含量分別提高11.9％和7.8％；NTG-β6 蝦青素產(chǎn)量和含量分別提高15.9％和20.3％。比較四個(gè)突變?cè)逯?/p>

3、，可見紫外線誘變效果較好。所以選擇紫外線突變株UV-N2、UV-β5 進(jìn)行復(fù)合誘變，經(jīng)過β-紫羅酮篩選，獲得了一株高產(chǎn)蝦青素UV-NTG 復(fù)合突變株UN-β5-6。UN-β5-6的蝦青素產(chǎn)量和含量分別為29.453 mg/L和14.913 mg/gDCW，較本輪出發(fā)株UV-β5 蝦青素產(chǎn)量和含量提高了17.9％和20.8％，較原始出發(fā)藻株分別提高了49.2％和60.4％，且遺傳性能穩(wěn)定。 ㈡測(cè)定出發(fā)藻株、UN-β5-6 綠色游

4、動(dòng)細(xì)胞階段和紅色厚壁孢子階段藻細(xì)胞的比生長(zhǎng)速率和蝦青素比積累速率，結(jié)果表明突變株綠色階段比生長(zhǎng)速率遠(yuǎn)低于出發(fā)株，紅色階段比生長(zhǎng)速率稍高于出發(fā)株；突變株蝦青素素比積累速率遠(yuǎn)高于出發(fā)藻株。計(jì)算Chla/Chlb 值，并分析藻細(xì)胞95％乙醇提取液的吸收光譜和熒光光譜（EX=337nm）以及常溫活體細(xì)胞熒光發(fā)射光譜的光譜特性（EX=490nm）。發(fā)現(xiàn)出發(fā)藻株綠色細(xì)胞階段Cha/Chb 值比突變株綠色細(xì)胞階段高而紅色階段結(jié)果相反，表明突變株綠色階