雨生紅球藻中蝦青素的提取及蝦青素對皮膚細胞損傷的保護作用.pdf

1、蝦青素是一種紅色類胡蘿卜素，具有很強的抗氧化和抗炎癥作用，在與人體營養(yǎng)與健康相關(guān)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景。隨著蝦青素的應(yīng)用范圍不斷擴大，提取劑的安全問題日益突出。本研究以雨生紅球藻為原料，研究了多種提取劑的提取率，以選出低毒高效的提取溶劑。同時，本試驗還研究了料液比、溫度及提取時間對雨生紅球藻中活性成分蝦青素提取率的影響，并通過正交試驗優(yōu)化提取參數(shù)，獲得最佳提取工藝。
　　UVA是導(dǎo)致皮膚細胞光老化的主要因素之一。UVA的輻照通過生

2、成大量的活性氧(ROS)，來引起細胞內(nèi)的脂質(zhì)與蛋白質(zhì)氧化損傷。同時還刺激和活化蛋白激酶信號通路，增加基質(zhì)金屬蛋白酶的基因轉(zhuǎn)錄，進而降解膠原蛋白，最終引起老化相關(guān)改變。
　　本研究用人皮膚成纖維細胞(HSF)來構(gòu)建UVA輻照損傷模型，通過MTT試驗和倒置顯微鏡觀察分析UVA對細胞增殖活性的影響;通過檢測ROS、丙二醛(MDA)和蛋白質(zhì)羰基的含量研究蝦青素在UVA誘導(dǎo)的皮膚光老化過程中的影響;結(jié)合RT-PCR和Western blot

3、等技術(shù)，對光損傷的機制做了更進一步的研究。
　　研究結(jié)果如下：
　　1、各因素對蝦青素提取率的影響大小依次為:料液比＞提取時間＞溫度＞提取溶劑。提取溶劑、料液比、溫度和提取時間的最佳條件分別是:乙酸乙酯∶乙醇(1∶1)、1∶100、40℃、20 min，最佳提取率為49.96％，所得提取物中蝦青素含量為21.15-22.32％。
　　2、蝦青素對UVA誘導(dǎo)的HSF細胞損傷具有保護作用
　　UVA的輻照對HSF細胞

4、的增殖活性有著明顯的抑制作用，并且呈現(xiàn)出劑量依賴關(guān)系。10.5 J/cm2的輻照劑量下，UVA對HSF細胞增殖活性的抑制率約為50％。UVA輻照前，中等劑量(6μM)蝦青素的預(yù)處理能顯著提高HSF細胞的增殖活性。
　　3、蝦青素對UVA誘導(dǎo)的HSF細胞抗氧化活性的影響
　　蝦青素預(yù)處理能夠顯著降低UVA誘導(dǎo)的人皮膚成纖維細胞中ROS、MDA、蛋白質(zhì)羰基的含量，分別下降11.98％、30.25％、30.05％，表明蝦青素通過減

5、少ROS的含量降低脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的過氧化作用，保護皮膚細胞。
　　4、蝦青素對UVA誘導(dǎo)的HSF細胞膠原蛋白含量的影響
　　蝦青素預(yù)處理能夠減少UVA輻照引起的HSF細胞中基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)的基因表達，MMP-1和MMP-3 mRNA的表達量分別下降53.8％和29.5％;HSF細胞中膠原蛋白Ⅳ、Ⅲ和Ⅰ含量增加59％、49％和15％，表明蝦青素可以通過減少基質(zhì)金屬蛋白酶的含量，抑制UVA引起的膠原蛋白的損傷與降解，減輕