EGb761逆轉(zhuǎn)NF-κB介導(dǎo)的胃癌細(xì)胞耐藥及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　探討銀杏葉提取物(ginkgo biloba extract，EGb761)對(duì)順鉑(cis-Diaminedichloroplatinum)誘導(dǎo)的人胃癌細(xì)胞株SGC-7901及耐藥細(xì)胞株SGC-7901/CDDP增殖和凋亡的影響及其對(duì)胃癌細(xì)胞化療耐藥的影響及其機(jī)制。
　　方法:
　　將實(shí)驗(yàn)分為SGC-7901及SGC-7901/CDDP兩大組，采用EGb761、順鉑以及EGb761+順鉑聯(lián)合應(yīng)用處理兩組細(xì)胞

2、，采用四甲基偶氮唑藍(lán)(methylthiazolyl tetrazolium，MTT)法分別檢測(cè)兩種細(xì)胞的增殖活性，流式細(xì)胞儀Annexin V-PE/7AAD雙染法檢測(cè)兩組細(xì)胞的凋亡，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)方法檢測(cè)NIBP、NF-κB P65 mRNA的表達(dá)水平，采用免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)NIBP、NF-κB P65蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　EGb761和順鉑均對(duì)兩種胃癌細(xì)胞的增

3、殖具有顯著的抑制作用，并呈劑量依賴(lài)性，但SGC-7901/CDDP細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性較SGC-7901細(xì)胞差。EGb761與順鉑聯(lián)合應(yīng)用時(shí)可明顯增強(qiáng)SGC-7901和SGC-7901/CDDP細(xì)胞株對(duì)順鉑的敏感性并促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。實(shí)時(shí)熒光定量PCR和免疫印跡結(jié)果均顯示SGC-7901/CDDP細(xì)胞株中NIBP和NF-κB p65的表達(dá)量比SGC-7901細(xì)胞株高，EGb761能明顯抑制由順鉑誘導(dǎo)的NIBP和NF-κB p65的表達(dá)。實(shí)時(shí)

4、熒光定量PCR結(jié)果顯示，SGC-7901細(xì)胞株vs SGC-7901/CDDP細(xì)胞株，各組NIBP mRNA相對(duì)表達(dá)量(SGC-7901組:空白對(duì)照組(1.065±0.039)，EGb761組(0.899±0.036)，順鉑組(1.444±0.058)，EGb761±順鉑組(1.107±0.040);SGC-7901/CDDP組:空白對(duì)照組(1.606±0.065)，EGb761組(1.363±0.067)，順鉑組(2.356±0.09

5、2)，EGb761±順鉑組(1.780±0.076)),NF-κB p65 mRNA相對(duì)表達(dá)量(SGC-7901組:空白對(duì)照組(1.115±0.036)，EGb761組(0.857±0.087)，順鉑組(1.480±0.148)，EGb761±順鉑組(1.148±0.056);SGC-7901/CDDP組:空白對(duì)照組(1.442±0.025)，EGb761組(1.206±0.071)，順鉑組(2.619±0.215)，EGb761±順鉑

6、組(1.634±0.072)。免疫印跡結(jié)果顯示，SGC-7901細(xì)胞株vs SGC-7901/CDDP細(xì)胞株，NIBP蛋白表達(dá)量:0.324±0.021 vs0.707±0.037，NF-κB P65蛋白表達(dá)量:0.783±0.029 vs1.540±0.038);各組NIBP的蛋白表達(dá)(SGC-7901組:空白對(duì)照組(0.324±0.021)，EGb761組(0.233±0.023)，順鉑組(0.590±0.023),EGb761±順

7、鉑組(0.328±0.022);SGC-7901/CDDP組:空白對(duì)照組(0.707±0.037)，EGb761組(0.591±0.037)，順鉑組(0.990±0.037)，EGb761±順鉑組(0.725±0.037));NF-κ Bp65的蛋白表達(dá)(SGC-7901組:空白對(duì)照組(0.783±0.029)，EGb761組(0.628±0.030)，順鉑組(1.138±0.029),EGb761±順鉑組(0.770±0.028);

8、SGC-7901/CDDP組:空白對(duì)照組(1.540±0.038)，EGb761組(0.865±0.031)，順鉑組(1.981±0.030)，EGb761±順鉑組(1.508±0.016))。
　　結(jié)論:
　　EGb761具有顯著的化療增敏、逆轉(zhuǎn)胃癌細(xì)胞耐藥的作用，可增強(qiáng)順鉑對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。其逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥的作用機(jī)制可能是通過(guò)抑制NF-κB通路的活性，減少NIBP和NF-κB p65的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)。