擬南芥F-box家族基因FOAl功能的初步研究.pdf

1、本文研究的擬南芥基因FOA1屬于F-box蛋白家族，通過(guò)軟件對(duì)其起始密碼子上游1500bp啟動(dòng)子進(jìn)行功能預(yù)測(cè)之后，發(fā)現(xiàn)其啟動(dòng)子區(qū)域存在大量激素響應(yīng)元件。但目前對(duì)此基因的報(bào)道僅限于生物信息學(xué)分析結(jié)果。本研究主要對(duì)擬南芥FOA1與ABA、GA的關(guān)系進(jìn)行了研究，取得了以下主要研究結(jié)果：
　　首先通過(guò)Gateway克隆技術(shù)、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的花序浸染法，獲得了2個(gè)過(guò)量表達(dá)FOA1的轉(zhuǎn)基因擬南芥株系FOA1ox1、FOA1ox2。同時(shí)從擬美國(guó)生物

2、資源中心(ABRC)購(gòu)買(mǎi)到FOA1 T-DNA插入突變體后，通過(guò)鑒定后得到FOA1 T-DNA插入純合突變體foa1用外源ABA、NaCl、GA3、MeJA、IAA、藍(lán)光脅迫處理野生型擬南芥不同時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)FOA1的表達(dá)均有變化，說(shuō)明FOA1的表達(dá)同時(shí)受ABA、NaCl、GA3、MeJA、IAA、藍(lán)光的調(diào)控。同時(shí)對(duì)FOA1組織特異性分析結(jié)果顯示FOA1在各個(gè)組織中均有表達(dá)，而在花和根中表達(dá)最高，說(shuō)明FOA1有可能主要在根和花中起作用。其

3、次通過(guò)在不同濃度ABA處理下，統(tǒng)計(jì)野生型、FOA1ox1、FOA1ox2、foa1的種子萌發(fā)、根伸長(zhǎng)、氣孔關(guān)閉、脯氨酸積累變化，發(fā)現(xiàn)foa1相比于其野生型Col-0對(duì)ABA更加敏感，而FOA1ox1、FOA1ox2對(duì)ABA的敏感性較野生型有所降低。ABA處理?xiàng)l件下，一系列ABA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子在foa1突變體中的轉(zhuǎn)錄水平比野生型高，而ABA及脅迫應(yīng)答基因在foa1突變體中的轉(zhuǎn)錄水平則比野生型低。說(shuō)明FOA1可能在ABA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中起負(fù)

4、調(diào)控作用，并可能通過(guò)調(diào)節(jié)ABA及脅迫應(yīng)答基因相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的降解而參與ABA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。最后通過(guò)統(tǒng)計(jì)在不同濃度GA3或PAC處理下，F(xiàn)OA1ox1、FOA1ox2的萌發(fā)、根長(zhǎng)、下胚軸變化情況，說(shuō)明foal相比于野生型表現(xiàn)出對(duì)GA3或PAC高敏感，F(xiàn)OA1ox1、FOA1ox2相比于野生型都表現(xiàn)出對(duì)GA3或PAC低敏感。當(dāng)用PAC、GA同時(shí)處理時(shí)，F(xiàn)OA1ox1、FOA1ox2對(duì)GA3敏感性升高，foa1對(duì)GA3的敏感性與野生型差別變小。實(shí)時(shí)