沙棘葉中主要黃酮類(lèi)成分的提取富集工藝研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)采用綠色新型的提取溶劑-低共熔溶劑對(duì)沙棘葉中五種主要黃酮類(lèi)成分蘆丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山奈酚和異鼠李素進(jìn)行高效快速提取，研究了低共熔溶劑微波輔助提取工藝，并對(duì)工藝參數(shù)進(jìn)行系統(tǒng)優(yōu)化，同時(shí)結(jié)合大孔吸附樹(shù)脂對(duì)提取液中的黃酮類(lèi)成分進(jìn)行分離富集，并對(duì)富集物進(jìn)行了系統(tǒng)的抗氧化活性評(píng)估。本論文建立了一套高效、快速、準(zhǔn)確檢測(cè)沙棘葉中活性成分的分析檢測(cè)方法和提取富集分離工藝，為合理開(kāi)發(fā)和高效利用沙棘資源提供了必要的科學(xué)依據(jù)。具體研究

2、結(jié)果如下:
　　1.建立了高效液相色譜同時(shí)分析檢測(cè)沙棘葉中蘆丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山奈酚和異鼠李素的方法:
　　色譜柱:KYA HIQ sil C18W column(250 mm×4.6 mm i.d.，5μm);流動(dòng)相:乙腈(A)-0.4％磷酸水溶液(B);流速:1 mL/min;柱溫:30C;檢測(cè)波長(zhǎng):254 nm和370nm;進(jìn)樣量:5μL。梯度洗脫條件:0-7 min，10-15％(A);7-10

3、min，15-17％(A);10-25 min,17-17％(A);25-27 min,17-18％(A);27-31 min,18-19％(A);31-34 min,19-19％(A);34-38 min,19-26％(A);38-42 min,26-26％(A);42-55 min,26-50％(A);55-60 min，50-10％(A)。
　　2.對(duì)微波輔助低共熔溶劑提取沙棘葉中蘆丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山奈

4、酚和異鼠李素的條件進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和工藝優(yōu)化，確定了最優(yōu)微波輔助低共熔溶劑提取的工藝參數(shù):
　　低共熔溶劑:氯化膽堿/1，4-丁二醇=1/3（摩爾比，含水量為20％）
　　提取溫度:64C
　　提取時(shí)間:18 min
　　液固比:20∶1 mL/g
　　在上述優(yōu)化的條件下對(duì)沙棘葉進(jìn)行提取，蘆丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山奈酚、異鼠李素的平均提取率分別為8.967 mg/g、1.809 mg/g、9.

5、107 mg/g、0.448mg/g、0.489 mg/g，提取效果優(yōu)于低共熔溶劑超聲輔助提取和低共熔溶劑熱回流輔助提取。
　　3.利用大孔吸附樹(shù)脂對(duì)沙棘葉低共熔溶劑提取液進(jìn)行富集分離，并對(duì)富集物的抗氧化活性進(jìn)行了評(píng)價(jià):
　　利用HPD-826，DM-130，D-3520，NKA-9，AB-8和D101六種型號(hào)的大孔吸附樹(shù)脂直接富集分離低共熔溶劑提取液中的黃酮成分，其中AB-8型號(hào)樹(shù)脂總體回收率最高，經(jīng)AB-8型號(hào)大孔吸附樹(shù)

6、脂處理后，蘆丁、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素、山奈酚和異鼠李素五種黃酮類(lèi)成分的回收率分別為83.59％、74.46％、84.99％、72.36％和77.85％。此外，在沙棘葉提取物的抗氧化活性的研究中，經(jīng)AB-8型號(hào)樹(shù)脂富集出的提取物的抗氧化能力最強(qiáng)，在DPPH自由基清除能力實(shí)驗(yàn)中，測(cè)定抗氧化能力的IC50值為0.074 mg/mL;在ABTS自由基清除能力實(shí)驗(yàn)中，抗氧化能力的的測(cè)定值為0.662mmol/g Trolox;在還原力