龍血竭黃酮類成分的生物活性研究.pdf

1、龍血竭是百合科龍血樹屬植物劍葉龍血樹[Dracaena cochinchinensis（Lour.） S. C. Chen]的含脂木材經(jīng)提取得到的紅褐色樹脂，具有活血化瘀、消腫止痛、收斂止血、軟堅散結(jié)、生肌斂瘡等功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，龍血竭具有降血糖、抗炎鎮(zhèn)痛、活血化瘀等多種藥理活性。然而目前龍血竭降血糖作用機制還沒有系統(tǒng)研究，其抗神經(jīng)病理性疼痛作用和抗慢性血瘀證作用的分子藥理學(xué)機制尚未明確，因此本文通過建立相應(yīng)的動物模型，研究龍血

2、竭黃酮類成分抗2型糖尿?。═2DM）作用、抗神經(jīng)病理性疼痛作用和抗慢性血瘀證作用，并初步探討其作用機制。
　　通過4周喂養(yǎng)高脂高糖飼料與一次性注射35 mg/kg鏈脲佐菌素（STZ）相結(jié)合建立T2DM動物模型。造模成功后，龍血竭總黃酮給藥干預(yù)21天，而陽性組給予200 mg/kg二甲雙胍。3周后，通過檢測相關(guān)指標(biāo)和制作病理組織切片去評價龍血竭總黃酮抗 T2DM作用。結(jié)果顯示：龍血竭總黃酮不僅能顯著降低T2DM模型大鼠血糖值，改善胰

3、島素抵抗癥狀，而且還能緩解與 T2DM相關(guān)的血脂異常、組織(肝臟和骨骼肌)脂肪堆積和氧化應(yīng)激等狀態(tài)。此外，龍血竭總黃酮能下調(diào)白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和C反應(yīng)蛋白（CRP）水平，并具有胰腺胰島保護作用。研究表明，龍血竭總黃酮有顯著的降血糖作用，其發(fā)揮抗 T2DM作用可能通過改善胰島素抵抗癥狀、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝紊亂、改善氧化應(yīng)激和微炎癥狀態(tài)以及保護胰腺胰島等途徑。
　　建立保留性神經(jīng)損傷（SNI）動物模型，連

4、續(xù)給藥治療14 d。分別記錄各組動物在術(shù)前1 d及術(shù)后1、3、5、7、14 d的機械縮足反射閾值（PMWT），術(shù)后14 d檢測各組大鼠的脊髓背角中的一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、TNF-α、白介素-1β（IL-1β）和白介素-10（IL-10）等指標(biāo)，采用Western blot方法檢測各組大鼠脊髓背角中成纖維細胞生長因子受體3（FGFR3）蛋白表達情況，并通過免疫組化法觀察脊髓背角中磷酸化的cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（p-C

5、REB）和神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白（GFAP）免疫反應(yīng)陽性細胞的表達情況。結(jié)果表明：龍血竭總黃酮能降低SNI模型大鼠PMWT，下調(diào)脊髓背角中NO、NOS、TNF-α、IL-1β水平，上調(diào)IL-10水平，并能抑制FGFR3、GFAP和p-CREB的表達。研究表明：龍血竭總黃酮具有一定的抗神經(jīng)病理性作用，它可能是通過干預(yù) FGFR3和p-CREB通路,調(diào)節(jié) GFAP的表達，從而抑制脊髓背神經(jīng)角膠質(zhì)細胞炎癥因子的釋放。
　　建立慢性血瘀證兔模型

6、，給藥干預(yù)4周后對各組血液流變學(xué)各項指標(biāo)以及血清一氧化氮（NO）和內(nèi)皮素（ET）水平進行檢測，并通過HE染色病理切片對兔心主動脈內(nèi)皮細胞形態(tài)學(xué)變化進行觀察比較。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與模型組相比，龍血竭總黃酮能降低慢性血瘀證兔模型全血粘度、血漿粘度、紅細胞壓積、紅細胞聚集指數(shù)和卡森粘度，能升高紅細胞變形指數(shù)和紅細胞剛性指數(shù)，對血小板聚集有抑制作用；同時能降低慢性血瘀證兔模型血清ET水平，升高NO水平；此外，各給藥組兔心主動脈HE染色病理切片內(nèi)皮細胞