白鵑梅中黃酮類物質(zhì)的分離純化和生物活性研究.pdf

1、本研究以白鵑梅為研究對(duì)象，優(yōu)化了微波提取白鵑梅黃酮類化合物的工藝條件；對(duì)白鵑梅黃酮類物質(zhì)進(jìn)行提取、純化及結(jié)構(gòu)鑒定；測(cè)定了白鵑梅不同溶劑萃取物以及黃酮類物質(zhì)的體外抗氧化活性；同時(shí)測(cè)定了白鵑梅三種黃酮單質(zhì)對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用。
　?。?）為了對(duì)白鵑梅黃酮類化合物的提取量進(jìn)行優(yōu)化，利用Box-Behnken進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取微波功率、提取時(shí)間、料液比、提取溫度作為優(yōu)化因素，采用響應(yīng)面分析法對(duì)微波提取白鵑梅黃酮類物質(zhì)工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)

2、果顯示：微波時(shí)間和微波溫度對(duì)白鵑梅黃酮提取量有顯著性影響。微波輔助提取的最佳工藝條件為：微波功率357W，提取時(shí)間63min，料液比1:26g/mL，提取溫度47℃。在此條件下實(shí)際提取量為14.59mg/g，與模型預(yù)測(cè)值14.67mg/g相近。
　?。?）用不同的溶劑對(duì)白鵑梅進(jìn)行分步萃取，利用硅膠柱層析、以及SePhadexLH-20柱層析等多種方法對(duì)乙酸乙酯相、正丁醇相進(jìn)行分離純化，并且通過(guò)UV、IR、HPLC、NMR等波譜檢測(cè)

3、技術(shù)結(jié)合物理化學(xué)等方法對(duì)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，得到黃酮單質(zhì)。
　?。?）對(duì)白鵑梅分步萃取物進(jìn)行活性測(cè)定，結(jié)果表明：乙醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇，水五種溶劑對(duì)白鵑梅進(jìn)行提取得到的提取物中，均有一定的抗氧化活性；經(jīng)過(guò)比較，乙酸乙酯相體外抗氧化活性相對(duì)最大。對(duì)其中的黃酮類物質(zhì)進(jìn)行體外抗氧化活性測(cè)定，分別測(cè)定了對(duì)DPPH自由基、羥基（·OH）自由基、超氧基自由基（O2-）三種自由基的清除能力，結(jié)果表明白鵑梅總黃酮對(duì)三種自由基清除的強(qiáng)弱順序

4、為：DPPH·>·OH>O2-，對(duì)DPPH以及羥基自由基有很好的清除效果，對(duì)過(guò)氧化自由基的清除能力則較低；并且，在一定的范圍內(nèi)，對(duì)三種自由基的清除效果與總黃酮濃度呈良好的線性關(guān)系。
　?。?）實(shí)驗(yàn)分別對(duì)蘆丁、芹菜素、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷三種黃酮單體進(jìn)行α-葡萄糖苷酶抑制作用進(jìn)行測(cè)定，以阿卡波糖作為陽(yáng)性對(duì)照。實(shí)驗(yàn)表明：三種單體對(duì)α-葡萄糖苷酶均有抑制作用，且芹菜素和蘆丁的作用效果優(yōu)于對(duì)照物阿卡波糖，芹菜素-7-O-β-D