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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討miR-424對(duì)宮頸鱗癌細(xì)胞侵襲遷移的抑制作用及調(diào)控。
方法:
1.通過(guò)莖環(huán)RT-PCR檢測(cè)宮頸鱗癌組織中miR-424的含量;
2.Tra ns we ll小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SiHa細(xì)胞侵襲能力;劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)遷移能力;
3.采用生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)靶基因,并用雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證;
4.通過(guò)免疫組化方法檢測(cè)靶基因的表達(dá);
5.利用RT-PCR和Westernblot檢
2、測(cè)內(nèi)源性靶基因及下游靶基因分子的mRNA和蛋白表達(dá)變化。
結(jié)果:
1.宮頸鱗癌組織中miR-424的含量明顯低于癌旁組織;
2.過(guò)表達(dá)miR-424能抑制宮頸鱗癌S iHa細(xì)胞的侵襲遷移能力;
3.生物信息學(xué)表明。miR-424的靶基因之一是Wnt3A,雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證明Wnt3A是miR-424的靶基因。
4.免疫組化結(jié)果表明,宮頸鱗癌組織中的Wnt3A表達(dá)陽(yáng)性;
5
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