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文檔簡介
1、研究背景與目的:腸易激綜合征(IBS)是以腹痛或腹部不適伴隨糞便性狀或排便習(xí)慣改變的一種功能性腸病,可分為腹瀉型、便秘型、混合型和未定型,其發(fā)病機制尚未明確。目前IBS發(fā)病機制中腸道動力異常研究較多,而腸道分泌功能異常卻鮮見報道。腸神經(jīng)系統(tǒng)(ENS)中黏膜下神經(jīng)叢(SMP)主要調(diào)控腸道分泌功能。ENS調(diào)控的腸道分泌功能改變在IBS發(fā)病機制中也可能有重要作用。本研究旨在研究IBS-C腸神經(jīng)系統(tǒng)中興奮性和抑制性分泌運動神經(jīng)元的活化狀態(tài),及I
2、BS-C腸神經(jīng)系統(tǒng)活動對腸道分泌功能的影響。
材料與方法:
1.冰水灌胃建立IBS-C大鼠動物模型,評價其體重、糞便顆粒數(shù)和含水量及胃腸道傳輸功能的變化。留取大鼠腸道標(biāo)本分別制作結(jié)腸SMP全層鋪片標(biāo)本和新鮮的結(jié)腸組織標(biāo)本(含黏膜下神經(jīng)叢+黏膜層)。
2.應(yīng)用免疫熒光多重染色技術(shù)檢測結(jié)腸SMP鋪片標(biāo)本SMP神經(jīng)元和活化神經(jīng)元的總數(shù),以及活化的特異性陽性神經(jīng)元(即ChAT、VIP、NOS陽性神經(jīng)元)的總數(shù)和所占
3、比例等指標(biāo),評價IBS-C模型大鼠SMP內(nèi)興奮性/抑制性分泌運動神經(jīng)元的活化狀態(tài)。
3.應(yīng)用Ussing Chamber系統(tǒng)探討IBS-C模型大鼠結(jié)腸腸道分泌功能的變化,及該變化與IBS-C腸神經(jīng)系統(tǒng)SMP內(nèi)興奮性分泌運動神經(jīng)元活動之間的關(guān)系。
實驗結(jié)果:研究發(fā)現(xiàn):
1.冰水灌胃處理后大鼠體重增長緩慢,糞便顆粒數(shù)減少且含水量下降,腸道傳輸功能減慢。
2.IBS-C大鼠結(jié)腸SMP神經(jīng)元存在改變,表現(xiàn)
4、為結(jié)腸SMP神經(jīng)元總數(shù)、活化神經(jīng)元總數(shù)(24.3±12.7比19.9±9.6,P<0.05,n=7)均顯著增多;且活化的NOS陽性神經(jīng)元比例(12.4±7.2比9.6±5.5,P<0.05,n=7)在結(jié)腸SMP中亦明顯增高;而結(jié)腸SMP中活化的ChAT陽性神經(jīng)元比例(49.0±15.8%比56.6±12.6%,P<0.05,n=7)、活化的VIP陽性神經(jīng)元比例(12.4±7.2比9.6±5.5,P<0.05,n=7)的則顯著降低。
5、> 3.模型組中,TTX對EFS的兩個時相P1(98.3%±40.0%比87.9%±43.6%, P<0.05)、P2(81.7%±36.0%比74.9%±30.4%, P<0.05,n=6)的抑制率和阿托品對EFS的P1(49.6%±19.7%比70.8%±26.9%,P<0.05,n=6)的抑制率與自身對照相比均明顯升高,但在兩組間均無統(tǒng)計學(xué)差異。阻斷SMP后,卡巴膽堿(129.6±75.4μA/cm2,n=6)、VIP(160.
6、5±100.6比147.9±74.2,P>0.05)引起的短路電流變化在兩組間無顯著差異。
實驗結(jié)論:
1.冰水灌胃大鼠可模擬IBS-C部分典型特征,建模成功。
2.SMP抑制性神經(jīng)元活化是導(dǎo)致IBS-C產(chǎn)生便秘的主要因素。
3.IBS-C基礎(chǔ)腸道分泌功能無明顯變化。
4.ENS可能參與IBS-C腸道分泌功能變化的調(diào)控,但與SMP的興奮性分泌運動神經(jīng)元活動關(guān)系不大,可能存在其他影響環(huán)節(jié)。
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