熱激誘導(dǎo)表達(dá)Hd3a基因的水稻轉(zhuǎn)化研究及Hd3a信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理初探.pdf

1、Hd3a(Heading date3a)基因是水稻開花調(diào)控途徑的信息整合基因(integrator)，負(fù)責(zé)將來自各種途徑的開花信號(hào)匯總起來，繼而誘導(dǎo)下游的花器官?zèng)Q定基因(floral organ identity genes)表達(dá)，從而誘導(dǎo)開花。研究表明，短日照誘導(dǎo)Hd3a在葉片中表達(dá)，然后其表達(dá)產(chǎn)物由葉片轉(zhuǎn)運(yùn)至莖尖，在那里作用于下游基因，故此產(chǎn)物被認(rèn)為是水稻進(jìn)行長(zhǎng)距離轉(zhuǎn)運(yùn)的開花信號(hào)物質(zhì)。但對(duì)于該信號(hào)物質(zhì)是Hd3a mRNA還是Hd3a

2、蛋白，還存在一定的爭(zhēng)議。本課題借鑒擬南芥中同源基因FT(Flowering locus T)的研究成果設(shè)計(jì)了一系列實(shí)驗(yàn)，用以考察Hd3a的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和作用機(jī)理。 本研究首先克隆了Hd3a基因，并構(gòu)建了熱激誘導(dǎo)Hd3a表達(dá)的載體pH2GW7-pHSP-Hd3a。通過農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumifaciens)介導(dǎo)的方法將該表達(dá)載體轉(zhuǎn)化野生型水稻日本晴(Nipponbare)，獲得了轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)篩選得到了轉(zhuǎn)基因高水