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1、目的:在灼燒技術(shù)(原灼烙技術(shù),經(jīng)國(guó)家名稱(chēng)規(guī)范后稱(chēng)灼燒技術(shù))治療慢性扁桃體炎前后進(jìn)行扁桃體組織取材,檢測(cè)人β-防御素-3(HBD-3、hBD-3)在扁桃體組織中的表達(dá),探討灼燒技術(shù)在治療慢性扁桃體炎中對(duì)hBD-3表達(dá)的影響,為闡明灼燒技術(shù)的治療原理、指導(dǎo)臨床工作提供理論依據(jù)。
方法:⑴試驗(yàn)分組:選擇慢性扁桃體炎病人15位,健康志愿者15位;在灼燒前,選取15位慢性扁桃體炎病人的扁桃體組織標(biāo)本15例做為本次試驗(yàn)的A組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)灼燒
2、治療前組);本次試驗(yàn)的15位慢性扁桃體炎患者,經(jīng)灼燒治療治愈后,觀察6月無(wú)復(fù)發(fā),再次鉗取扁桃體組織標(biāo)本15例做為本次試驗(yàn)的B組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)灼燒治愈組);健康志愿者15位,選其扁桃體組織標(biāo)本15例納入本次試驗(yàn)的C組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)健康志愿組)。⑵A、B、C組,進(jìn)行石蠟包埋組織并切片制作病理標(biāo)本,從形態(tài)學(xué)觀察及免疫組織化學(xué)檢測(cè)hBD-3。⑶分別提取A、B、C組扁桃體組織總RNA,用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)標(biāo)本中hBD-3轉(zhuǎn)錄水平的表
3、達(dá)。⑷A、B、C組,提取扁桃體組織用Western blotting檢測(cè)hBD-3在蛋白水平的表達(dá)。
結(jié)果:①蘇木精-伊紅染色結(jié)果顯示:A組是慢性扁桃體炎組織,B組、C組為正常扁桃體組織,無(wú)慢性炎癥。②免疫組化半定量積分分析hBD3表達(dá)結(jié)果,A組15個(gè)標(biāo)本中有強(qiáng)陽(yáng)性、陽(yáng)性、弱陽(yáng)性的例數(shù)分別為12、2、1;B組15例有14例陰性、1例弱陽(yáng)性;C組15例中有14例陰性、1例弱陽(yáng)性。選擇秩和檢驗(yàn),灼燒治療前組的hBD3在免疫組化中的
4、表達(dá)量明顯高于健康志愿者組,且差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。灼燒治療前組hBD3在免疫組化中的表達(dá)量明顯高于灼燒技術(shù)治愈組,且差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。③RT-PCR結(jié)果顯示A組觀察到約182bp的片段,在約為182bp處有明亮的單一條帶顯示,與設(shè)計(jì)的hBD3片段長(zhǎng)度一致。B組、C組均在約為182bp處有較灰暗的單一條帶顯示。選擇t檢驗(yàn),灼燒治療前組hBD3基因的表達(dá)量明顯高于健康志愿者組,且差異顯著,具有統(tǒng)
5、計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。灼燒治療前組hBD3基因的表達(dá)量明顯高于灼燒技術(shù)治愈組,且差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。④westernblotting的檢測(cè)結(jié)果顯示A組可見(jiàn)分子量約5KD較深的條帶,與預(yù)期的hBD3蛋白分子量大小相同。而B(niǎo)組、C組分子量約5KD較淺的條帶。選擇t檢驗(yàn),灼燒治療前組hBD3蛋白的表達(dá)量明顯高于健康志愿者組,且差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。灼燒治療前組hBD3蛋白的表達(dá)量明顯高于灼燒技術(shù)治
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