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文檔簡介
1、目的:應用不同濃度血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)持續(xù)刺激培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)24小時以模擬高血壓狀態(tài),測定HUVECs培養(yǎng)上清液中IL-33、sST2的濃度;測定原發(fā)性高血壓病患者血漿中IL-33、sST2濃度變化以及與血壓水平之間的關系。
方法:
一、選擇生長狀態(tài)良好的5-8代體外培養(yǎng)的HUVECs進行實驗。先進行無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后,將細胞分成4組,分別為空白對照組,AngⅡ1組,AngⅡ2組和An
2、gⅡ3組,調定每組細胞濃度為1×106/ml,分別以0,10-5mol/L,10-3mol/L和10-1mol/L濃度的AngⅡ干預繼續(xù)培養(yǎng)24h。留取細胞上清液,采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法分別測定各組細胞上清液中IL-33及sST2濃度。
二、對2013年11月-2014年2月間,在我院心內(nèi)科及腦卒中篩查門診中,隨機納入初診為原發(fā)性高血壓病患者87例為高血壓組,并根據(jù)所測得血壓值的水平按高血壓診斷的分級標準,分為1
3、級組,2級組和3級組,每組病例均為29例,同時納入在性別、年齡等方面相匹配的人群作為對照組(n=29)。所有入選者均記錄基本資料、詢問病史、測量血壓以及抽取靜脈血。收集血漿保存于-80℃冰箱,標本齊全后采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法測定血漿中IL-33及sST2濃度。
結果:
一、細胞實驗部分:(1)HUVECs細胞中AngⅡ1組,AngⅡ2組和AngⅡ3組培養(yǎng)上清液中IL-33濃度分別為[(99.51±51.
4、19)pg/ml],[(199.28±21.71)pg/ml]和[(167.93±6.98)pg/ml],與空白對照組[(42.42±0.83)pg/ml]比較均明顯升高,差異均有統(tǒng)計學意義(均 P<0.05),其中 AngⅡ2組 HUVECs培養(yǎng)上清液中 IL-33濃度均高于AngⅡ1組或AngⅡ3組,差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)。(2) HUVECs細胞中 AngⅡ1組,AngⅡ2組和AngⅡ3組培養(yǎng)上清液中sST2濃度分別
5、為[(19.73±4.79)pg/ml],[(35.86±5.25)pg/ml]和[(52.48±4.40)pg/ml],與空白對照組[(3.80±0.05)pg/ml]比較均明顯升高,差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05);且呈濃度依賴性。
二、臨床實驗部分:(1)原發(fā)性高血壓病患者血漿中 IL-33濃度[(311.18±411.96)pg/ml]和sST2濃度[50.14±50.85)pg/ml]與對照組[(149.25±2
6、45.43)pg/ml]和[(19.40±25.60)pg/ml]比較均明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)。(2)高血壓1級組,2級組和3級組患者血漿中 IL-33濃度分別為[(268.52±374.02)pg/ml],[(259.31±342.22)pg/ml]和[(405.72±500.33)pg/ml]與對照組[(149.25±245.43)pg/ml]比較均明顯升高,差異均有統(tǒng)計學意義(均 P<0.05);其中高血壓3
7、級組患者血漿中IL-33濃度與1級組或2級組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);(3)高血壓1級組,2 級組和3級組患者血漿中 sST2濃度分別為[(30.85±36.36)pg/ml],[(43.55±49.73)pg/ml]和[(76.02±55.00)pg/ml]與對照組[(19.40±25.58)pg/ml]比較均明顯升高,差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05);且呈濃度依賴性。(4)原發(fā)性高血壓病患者血漿中 IL
8、-33濃度與收縮壓值或舒張壓值均無明顯相關性(r=0.185,0.183,均P>0.05);原發(fā)性高血壓病患者血漿中 IL-33濃度與平均動脈壓值呈正相關(r=0.214,P<0.05);(5)原發(fā)性高血壓病患者血漿中 sST2濃度值與收縮壓、舒張壓或平均動脈壓都呈正相關(r=0.211,0.327和0.325,均P<0.05);原發(fā)性高血壓病患者血漿中IL-33濃度與sST2濃度之間沒有明顯相關性(r=0.133,P>0.05)。
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