白細(xì)胞介素-33-ST2通路介導(dǎo)狼瘡腎炎的機(jī)制探討.pdf

1、研究背景:白細(xì)胞介素（IL）-33是2005年首次發(fā)現(xiàn)的IL-1家族的新成員，廣泛存在于人類多個組織器官中，主要表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)，當(dāng)組織受損時，由細(xì)胞內(nèi)分泌至細(xì)胞外，并在IL-1受體輔助蛋白（IL-1RAcP）的參與下與特異性受體ST2結(jié)合，激活核轉(zhuǎn)錄因子（NF）-κB、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路，產(chǎn)生一系列下游炎癥因子，而可溶性ST2（sST2）則作為誘騙受體，抑制炎癥反應(yīng)。IL-33的作用與IL-1α和高遷

2、移率族蛋白B1（HMGB1）類似，被稱為內(nèi)源性警報素。目前研究發(fā)現(xiàn)，IL-33/ST2信號通路參與了包括炎癥、腫瘤、過敏性及風(fēng)濕免疫性等多種疾病的發(fā)生發(fā)展。
　　系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種累及多個系統(tǒng)的、體內(nèi)存在多種自身抗體的自身免疫性疾病，且多累及腎臟。已有研究發(fā)現(xiàn)SLE患者血清sST2與疾病活動度、抗ds-DNA抗體正相關(guān)，與C3負(fù)相關(guān)。另一方面，在急、慢性腎臟損傷中，血清IL-33或sST2異常升高，抗IL-33抗體可減

3、輕MRL/lpr小鼠腎炎的病情。因此，目前認(rèn)為IL-33/ST2信號通路與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)病相關(guān)，可能介導(dǎo)了腎臟纖維化損害，但是具體機(jī)制尚未明確。
　　目的:
　　1、探討SLE患者血清中IL-33、sST2的表達(dá)及其與疾病活動度、相關(guān)臨床指標(biāo)的關(guān)聯(lián)。
　　2、探討IL-33在腎臟的儲備細(xì)胞及其與狼瘡腎炎的關(guān)聯(lián)。
　　3、體外探討IL-33對人腎臟細(xì)胞的影響。
　　材料和方法:
　　1、納入50例2

4、014年1-12月于廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院的SLE患者（46例女性和4例男性），同時選取性別、年齡匹配的健康對照者30例。所有患者均有完整的臨床資料，于清晨空腹抽血留取血清，ELISA檢測SLE患者和健康對照者血清IL-33、sST2的表達(dá)水平。
　　2、取SLE患者腎組織穿刺石蠟切片，通過間接免疫熒光染色定位IL-33在腎臟的儲備細(xì)胞。
　　3、5例有腎損害臨床表現(xiàn)（血尿/蛋白尿）并于住院期間行腎組織穿刺活

5、檢的SLE患者，病理均證實(shí)為狼瘡腎炎。取腎穿刺組織約0.3×0.1cm，另取腎臟腫瘤標(biāo)本2例，腎萎縮手術(shù)切除標(biāo)本1例，提取總RNA及總蛋白，分別用實(shí)時定量PCR及Western blot方法檢測腎組織IL-33基因及蛋白表達(dá)水平。
　　4、體外培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞、腎小球系膜細(xì)胞及腎小管上皮細(xì)胞，分別加入 IL-33、IL-33+IL-12，觀察細(xì)胞活力，并檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清的炎癥因子。
　　結(jié)果:
　　一、SLE患者血清中IL

6、-33、sST2的表達(dá)及其與疾病活動度、相關(guān)臨床指標(biāo)的關(guān)聯(lián)
　　1、SLE患者血清sST2、IL-33濃度及IL-33/sST2比值均高于HC。
　　2、SLE患者血清sST2濃度與SLEDAI、ESR、24h尿蛋白、甘油三酯正相關(guān)，與C3負(fù)相關(guān)，其中SLEDAI、甘油三酯獨(dú)立相關(guān)。
　　3、SLE患者血清IL-33濃度與SLEDAI、ESR、24h尿蛋白、CKD分期、甘油三酯正相關(guān)，與C3、C4、eGFR、白蛋白負(fù)相

7、關(guān)，其中SLEDAI、C3、eGFR獨(dú)立相關(guān)。
　　4、SLE患者血清IL-33/sST2比值與SLEDAI、eGRF正相關(guān)，與病程、起病年齡、激素用量、CKD分期、血肌酐、C3、C4、ALB負(fù)相關(guān)，其中CKD、白蛋白獨(dú)立相關(guān)， CKD3期以上該比值顯著下降。
　　二、IL-33在腎臟的儲備細(xì)胞及其與狼瘡腎炎的關(guān)聯(lián)
　　1、LN患者腎組織切片見IL-33表達(dá)，與CD34陽性細(xì)胞內(nèi)DAPI共表達(dá)。
　　2、LN患者

8、腎臟高表達(dá)IL-33，與腎臟腫瘤患者相比無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　三、體外探討IL-33對人腎臟細(xì)胞的影響。IL-33刺激可使內(nèi)皮細(xì)胞及腎小管上皮細(xì)胞生長受抑，并釋放TNF-α、IL-4、IL-5、IL-6、IL-13，以IL-6最多；對腎小球系膜細(xì)胞無明顯影響。
　　結(jié)論:
　　1、SLE患者血清IL-33、sST2水平升高，且與疾病活動度及其他能反映SLE病情的多個臨床實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)相關(guān)。
　　2、IL-33在腎臟的儲