白細胞介素-33-ST2軸在乙肝相關(guān)慢加急性肝衰竭中的表達及作用的研究.pdf

1、目的：研究IL-33/ST2軸在乙肝相關(guān)慢加急性肝衰竭（HBV-ACLF）中的動態(tài)表達，并探討IL-33/ST2軸作為HBV-ACLF患者預(yù)后判斷的生物標志物或治療干預(yù)新靶點的可能性。
　　方法：利用ELISA法檢測健康對照、慢乙肝及HBV-ACLF患者IL-33和sST2血清水平的動態(tài)變化，并收集 HBV-ACLF患者疾病過程中相關(guān)的臨床資料。D-GalN/LPS腹腔注射誘導(dǎo)急性小鼠肝衰竭，Real-time PCR法和 Wes

2、tern blot法檢測肝組織內(nèi)IL-33和ST2L的動態(tài)改變。免疫組織化學(xué)法了解肝衰竭時肝內(nèi)IL-33的細胞來源。以過氧化氫誘導(dǎo)L02肝細胞氧化應(yīng)激損傷，CCK-8法檢測IL-33對氧化應(yīng)激所致細胞毒性的影響。
　　結(jié)果：ELISA檢測結(jié)果顯示，健康對照、慢乙肝及HBV-ACLF患者的血清IL-33基線水平均較低，三組間無顯著差異。而血清sST2基線水平在三組人群中明顯不同：慢乙肝（34.00±4.55 ng/ml）和HBV-A

3、CLF患者（82.19±7.61 ng/ml）的血清sST2水平明顯高于健康對照組（9.86±1.10 ng/ml），尤其以HBV-ACLF患者sST2水平最高。對本研究中入組的HBV-ACLF患者進行亞組分析發(fā)現(xiàn)，HBV-ACLF非存活組的血清sST2基線水平顯著高于存活組（101.07±13.30 vs63.59±6.13 ng/ml）（p<0.01）。此外，從基線第一周到第四周非存活患者的血清sST2水平幾乎沒有發(fā)生變化，始終處于

4、較高水平；而在同一時期，HBV-ACLF存活患者的血清sST2水平卻發(fā)生了大幅度下降，使得二者的血清 sST2水平進一步拉開了差距。在此基礎(chǔ)上我們又進一步分析了HBV-ACLF組血清sST2水平與最新的ACLF預(yù)后評分系統(tǒng)的相關(guān)性。結(jié)果顯示，血清sST2水平與CLIF-C OF、CLIF-C ACLF評分和ACLF分級呈顯著正相關(guān)。ROC曲線證實血清sST2水平能較好地預(yù)測HBV-ACLF患者的6個月死亡率，并且其預(yù)測價值與以上各評分系

5、統(tǒng)相比無統(tǒng)計學(xué)差異。以血清sST2基線水平76ng/ml或第四周時53ng/ml為臨界值將HBV-ACLF患者分為兩組，我們發(fā)現(xiàn)sST2水平在臨界值以上的患者其6個月死亡率顯著高于在臨界值以下的患者。在D-GalN/LPS誘導(dǎo)的小鼠肝衰竭模型中，隨著病情進展，肝內(nèi)IL-33 mRNA水平不斷升高，在7h達到高峰。而肝內(nèi)ST2L受體蛋白含量在3h顯著升高，之后開始不斷下降，到7h下降至最低。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，肝衰竭肝臟內(nèi)IL-33主要

6、表達于血管內(nèi)皮細胞和肝血竇細胞核內(nèi)，與健康小鼠肝內(nèi)IL-33的定位相同。以800 umol/L的過氧化氫誘導(dǎo)L02肝細胞發(fā)生氧化應(yīng)激損傷后，用10 ng/mL到400 ng/mL等不同濃度的IL-33處理肝細胞24h，并不能顯著影響肝細胞的存活率。
　　結(jié)論：研究證明了IL-33/ST2軸的確參與HBV-ACLF的發(fā)生發(fā)展過程。并且，血清sST2或可作為新的生物標志物用于評估HBV-ACLF的嚴重程度、早期預(yù)測患者的預(yù)后，為早期識