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文檔簡(jiǎn)介
1、本研究以一株產(chǎn)共軛亞油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)的植物乳桿菌為出發(fā)菌株,以10 kev氮離子對(duì)出發(fā)菌進(jìn)行多次誘變選育,以期得到一株高產(chǎn)CLA的誘變菌株,并且對(duì)該誘變菌株適宜產(chǎn)CLA的條件進(jìn)行了研究,同時(shí)為了比較出發(fā)菌株和誘變菌株在分子水平的差異,利用30條隨機(jī)引物對(duì)出發(fā)菌株和誘變菌株進(jìn)行了RAPD比較分析,并且應(yīng)用SDS-PAGE技術(shù)作為研究出發(fā)菌株和誘變菌株遺傳突變分析的輔助手段。主要研究結(jié)果如下:
2、
1.在注入能量為10 keV,劑量為0(對(duì)照)~120×2.6×1013ions/cm2條件下對(duì)出發(fā)菌株ANCLA02進(jìn)行誘變,結(jié)果表明:存活曲線與文獻(xiàn)報(bào)道的“馬鞍型”曲線基本符合。注入誘變高產(chǎn)CLA菌株的適宜劑量為60×2.6×1013N+/crr12。篩選獲得的誘變菌株ANCLA02的CLA產(chǎn)量為106.67μg/mL,比出發(fā)菌株提高了1.5倍。誘變菌株經(jīng)5代培養(yǎng),產(chǎn)CLA性能穩(wěn)定。
2.對(duì)誘變菌株適宜
3、產(chǎn)CLA條件進(jìn)行了初步研究,得到植物乳桿菌的最適產(chǎn)CLA條件為:亞油酸為誘導(dǎo)物,并且亞油酸添加量為0.1%,菌株的接種量為4%,初始PH為6.5,在37℃條件下發(fā)酵培養(yǎng)24小時(shí),可使CLA產(chǎn)量達(dá)到最大。
3.將出發(fā)菌株和誘變菌體進(jìn)行全細(xì)胞蛋白電泳,比較出發(fā)菌株和誘變菌株菌體內(nèi)蛋白質(zhì)表達(dá)的差異,結(jié)果顯示:出發(fā)菌株和誘變菌株在全細(xì)胞蛋白的表達(dá)上無(wú)差異。
4.本試驗(yàn)共選用了30條隨機(jī)引物,用他們對(duì)出發(fā)菌株和誘變菌株
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