中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)D-絲氨酸在大鼠電針耐受中的作用.pdf

1、NMDA受體（N-甲基-D-天冬氨酸受體，N-methyl-D-aspartate receptor）是離子型谷氨酸受體的一個亞型，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育及多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病中發(fā)揮重要的生理及病理功能。NMDA受體NR1亞基上存在“甘氨酸位點(diǎn)（glycine site）”，該位點(diǎn)被甘氨酸結(jié)合后，谷氨酸（glutamic acid）才能有效開放NMDA受體偶聯(lián)的離子通道。多年研究顯示，D-絲氨酸（D-serine, D-Ser）才是NMDA受體

2、NR1亞基“甘氨酸位點(diǎn)”的內(nèi)源性配體，D-Ser通過調(diào)節(jié)NMDA受體的激活參與機(jī)體多種生理及病理過程，其中包括痛覺信息的調(diào)制過程。針對中樞神經(jīng)系統(tǒng)D-Ser功能的研究近年已成為神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。電針（EA）是將傳統(tǒng)針灸與電療相結(jié)合，進(jìn)而產(chǎn)生臨床鎮(zhèn)痛作用，但長時間或反復(fù)多次給予電針刺激，電針的鎮(zhèn)痛效應(yīng)會逐漸減低以致消失，表現(xiàn)為電針耐受，限制其在臨床中的運(yùn)用。中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)（PAG）是機(jī)體內(nèi)源性鎮(zhèn)痛系統(tǒng)的關(guān)鍵部位，特別是其腹外

3、側(cè)區(qū)（vlPAG），在疼痛調(diào)制和嗎啡耐受的形成、維持機(jī)制中均有重要作用。大量研究顯示，嗎啡耐受和電針耐受之間存在交叉耐受，但在vlPAG中D-Ser是否可以通過調(diào)節(jié)NMDA受體功能參與電針耐受的形成和維持機(jī)制，這一點(diǎn)未見文獻(xiàn)報道。本研究旨在明確在vlPAG中D-Ser是否介入大鼠電針耐受的形成和維持機(jī)制。
　　目的：觀察大鼠中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)腹外側(cè)區(qū)（vlPAG）中D-Ser在大鼠電針耐受形成和維持中的作用并探討其初步的中樞神經(jīng)化

4、學(xué)機(jī)制。
　　方法：SD大鼠外周穴位給予多次電針刺激后建立大鼠電針耐受模型；觀察電針耐受大鼠機(jī)械痛閾（MWT）、熱痛閾（TWL）變化百分?jǐn)?shù)的改變；ELISA法檢測大鼠在電針耐受形成前后vlPAG中D-Ser水平變化；免疫組化、免疫印跡法檢測大鼠電針形成前后vlPAG中SR的表達(dá)部位及蛋白表達(dá)量的變化情況；免疫組化法檢測大鼠電針耐受形成前后 vlPAG中星形膠質(zhì)細(xì)胞活化的情況；電針耐受大鼠vlPAG微量注射不同劑量的星形膠質(zhì)細(xì)胞抑制

5、劑-氟代檸檬酸（Fc）后再行電針刺激，觀察大鼠MWT、TWL變化百分?jǐn)?shù)變化并檢測D-Ser水平變化情況。
　　結(jié)果：在各觀察時間點(diǎn)，假電針組大鼠MWT、TWL變化百分?jǐn)?shù)與正常組大鼠相比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；電針組大鼠MWT、TWL變化百分?jǐn)?shù)與正常組比較顯著升高（P＜0.001），但隨著電針刺激次數(shù)的增多，MWT、TWL變化百分?jǐn)?shù)逐漸下降，6次電針后MWT、TWL趨近于正常組痛閾變化百分?jǐn)?shù)值，P＞0.05，提示：大鼠

6、電針耐受形成。同一時間點(diǎn)，電針耐受大鼠vlPAG中D-Ser水平升高、SR陽性細(xì)胞數(shù)和SR蛋白含量表達(dá)上調(diào)（P＜0.001），且vlPAG中星形膠質(zhì)細(xì)胞活化表達(dá)量增多，與正常組、假電針組比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）；電針耐受大鼠vlPAG中微量注射不同劑量的Fc后再給予電針刺激，星型膠質(zhì)細(xì)胞活化受抑制，vlPAG中D-Ser水平下降，大鼠MWT、TWL變化百分?jǐn)?shù)升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001），提示大鼠電針耐受緩