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文檔簡介
1、本文以花背蟾蜍蝌蚪為對象,利用生物顯微技術(shù)研究了花背蟾蜍蝌蚪肺的發(fā)生;采用免疫組織化學(xué)方法研究了表皮生長因子受體(EGFR)、轉(zhuǎn)化生長因子B(TGF-β<,1>,TGF-β<,2>,TGF-β<,3>)在花背蟾蜍蝌蚪肺發(fā)育過程中的表達(dá)情況,利用美國Image-pro plus5.0專業(yè)圖像分析軟件對表皮生長因子受體(EGFR)、轉(zhuǎn)化生長因子B(TGF-β<,1>,TGF-β<,2>,TGF-β<,3>)的表達(dá)強(qiáng)度進(jìn)行定量分析。
2、1.花背蟾蜍的肺開始發(fā)生在幼蟲時期的第21期,它起始于咽部后側(cè),向腹側(cè)突起形成肺芽,肺芽經(jīng)22、23、24期的緩慢發(fā)育,直到25期才開始分化出現(xiàn)微小的肺囊,但是里面充滿液體,到30期開始形成明顯的肺囊,且肺囊中已有氣體,33期開始出現(xiàn)肺泡,36期時肺壁已充分伸展,肺泡增多,肺壁變薄,典型的氣.血屏障開始形成,37期肺壁內(nèi)表面的網(wǎng)狀隔膜明顯,到38期時肺壁進(jìn)一步變薄,39期肺已接近幼蟾肺,成年花背蟾蜍的肺成囊狀,并且在肺的內(nèi)壁上有許多網(wǎng)狀
3、隔膜,將肺的內(nèi)壁分隔形成許多小室,在每個小室內(nèi)又有少數(shù)次級皺褶將小室分隔為數(shù)個近似半球形或“C”形小腔,肺內(nèi)表面覆蓋有一層肺上皮細(xì)胞。 2.花背蟾蜍胎肺發(fā)育的早期,EGFR主要表達(dá)于肺網(wǎng)狀隔膜的上皮細(xì)胞,且較集中于上皮細(xì)胞的游離表面;37-39期,EGFR在肺泡囊及肺泡上皮細(xì)胞的陽性表達(dá)最活躍,EGFR在間充質(zhì)細(xì)胞區(qū)域性分布更加明顯;幼蟾期,EGFR陽性反應(yīng)主要定位在肺泡上皮細(xì)胞,在肺網(wǎng)狀隔膜處幾乎不表達(dá)。 EGFR表達(dá)
4、變化的定量分析顯示在花背蟾蜍胎肺發(fā)育的全過程中,EGFR的表達(dá)水平呈逐漸上升狀態(tài),在30-35期變化比較平穩(wěn),至37期達(dá)到峰值,繼而逐漸下降,39期和幼蟾期的表達(dá)水平又有所回升。 3.TGF-β<,1>,TGF-β<,2>,TGF-β<,3>三者均定位于細(xì)胞漿,陽性表達(dá)區(qū)域基本一致。30-36期,TGF-β在肺網(wǎng)狀隔膜處和間充質(zhì)細(xì)胞均呈現(xiàn)弱陽性,并且在網(wǎng)狀隔膜處呈區(qū)域性分布特點;37-39期,TGF-β在肺網(wǎng)狀隔膜處表達(dá)變?nèi)?,?/p>
5、平滑肌和肺間質(zhì)細(xì)胞TGF-β呈強(qiáng)陽性表達(dá):幼蟾期,血管周圍的平滑肌和肺間質(zhì)細(xì)胞處呈陽性表達(dá)。 TGF-β表達(dá)變化的定量分析顯示在花背蟾蜍肺發(fā)育的全過程中,TGF-β(β<,1>,β<,2>,β<,3>)的表達(dá)呈間歇性變化,表明TGF-β在不同的生長時期,在肺組織中的表達(dá)均不同。 4.在花背蟾蜍胎肺發(fā)育的不同時期,EGFR,TGF-β<,1>,TGF-β<,2>,TGF-β<,3>因子在肺網(wǎng)狀隔膜處和肺泡上皮細(xì)胞處的表達(dá)定
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