白細(xì)胞介素-27在單純皰疹病毒性角膜基質(zhì)炎小鼠角膜組織中的表達(dá).pdf

1、目的:
　　研究白細(xì)胞介素-27(interleukin-27，IL-27)在單純皰疹病毒性角膜基質(zhì)炎(herpetic stromal keratitis，HSK)小鼠角膜組織中的表達(dá)。
　　方法:
　　將1.0×106空斑單位的單純皰疹病毒1型(HSV-1)KOS毒株接種于BALB/c鼠的角膜上，建立HSK動物模型。分別于病毒接種前(0 d)，接種后1、3、5、7、8、10、14、21、28 d在裂隙燈顯微鏡下觀察

2、小鼠角膜的臨床變化;采用蘇木精-伊紅染色觀察角膜的組織病理學(xué)改變;采用免疫熒光和免疫印跡法檢測IL-27在小鼠角膜組織中的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、成功構(gòu)建了HSK動物模型。
　　2、裂隙燈顯微鏡觀察顯示:實驗組小鼠角膜接種HSV-1后第7d，小鼠出現(xiàn)角膜基質(zhì)炎的改變，表現(xiàn)為角膜基質(zhì)灰白色混濁，并逐漸加重，于接種后第14d角膜基質(zhì)混濁達(dá)到高峰，并有大量新生血管生成，之后逐漸減輕。對照組未接種病毒的小鼠角膜均未見明顯變

3、化。
　　3、蘇木精-伊紅染色觀察顯示:實驗組小鼠角膜接種HSV-1后第14d時角膜基質(zhì)層高度水腫、增厚，角膜基質(zhì)內(nèi)大量的炎性細(xì)胞浸潤，角膜新生血管增生。對照組未接種病毒的小鼠角膜均無明顯病理性改變。
　　4、免疫熒光觀察顯示:實驗組小鼠角膜接種HSV-1后第14d時，IL-27的兩個亞基EBI3與p28均在小鼠角膜的上皮層、基質(zhì)層及內(nèi)皮層呈強(qiáng)陽性表達(dá)，EBI3表現(xiàn)為強(qiáng)的紅色熒光，p28表現(xiàn)為強(qiáng)的綠色熒光。而對照組未接種病毒

4、的小鼠角膜組織中未見IL-27的兩個亞基EBI3與p28的陽性表達(dá)。
　　5、免疫印跡法觀察顯示:未接種病毒的對照組小鼠的角膜組織中IL-27的兩個亞基EBI3與p28的表達(dá)量分別為0.320±0.035和0.344±0.035，實驗組小鼠接種病毒后第14d時角膜組織中EBI3和p28的表達(dá)量分別為0.904±0.046和1.426±0.041。統(tǒng)計分析顯示，IL-27的兩個亞基EBI3和p28在實驗組小鼠角膜組織中的表達(dá)量明顯高