2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本課題擬將脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADSCs)移植于大鼠心肌梗死后缺血再灌注(MI/R)模型中,比較其對炎癥反應(yīng)和心臟功能的影響及機(jī)制,尋找到心肌缺血再灌注損傷及心室重構(gòu)防治的新靶點(diǎn),為干細(xì)胞應(yīng)用于心梗后心力衰竭的防治提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)及新的研究思路。
  方法:1)建立大鼠MI/R模型,血液分析儀檢測血中中性粒細(xì)胞隨時間變化情況,HE染色、免疫熒光染色及流式細(xì)胞學(xué)分析心臟中中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞隨時間浸潤情況,同時確定ADSCs的

2、移植時機(jī);2)體外分離、培養(yǎng)、鑒定大鼠ADSCs,不同時機(jī)靜脈注射到MI/R模型,28d后超聲心動圖及血流動力學(xué)檢測FS、EF、+dp/dtmax、-dp/dtmin等心臟功能指標(biāo),48h后TTC/Evans blue染色觀察心梗面積,HE染色、免疫熒光染色及流式細(xì)胞學(xué)分析心臟中中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞隨時間浸潤情況以及中性粒細(xì)胞CD11b、巨噬細(xì)胞CD163表達(dá)情況;3)48h后流式細(xì)胞術(shù)檢測心臟中巨噬細(xì)胞CD163表達(dá)情況及其對中性粒細(xì)

3、胞的吞噬。體外分離培養(yǎng)鑒定巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞,CFSE標(biāo)記中性粒細(xì)胞,流式細(xì)胞學(xué)分析中性粒細(xì)胞24h凋亡情況;將巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞與ADSCs共培養(yǎng),免疫熒光染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測巨噬細(xì)胞CD163表達(dá)及其對中性粒細(xì)胞的吞噬情況。
  結(jié)果:1)血中中性粒細(xì)胞數(shù)量隨時間動態(tài)變化,與假手術(shù)組相比,MI/R組中性粒細(xì)胞數(shù)量在12h后仍持續(xù)上升,同時心臟中大量中性粒細(xì)胞浸潤,在24h左右達(dá)到頂峰;2)與MI/R相比,ADSCs移植組2

4、8d后FS、EF、+dp/dtmax、-dp/dtmin等顯著升高,48h后心梗區(qū)面積、心梗區(qū)與危險區(qū)的比值顯著減小,其中再灌注時移植的效果優(yōu)于24h后移植。24h后與MI/R組相比,再灌注時ADSCs移植組心臟中中性粒細(xì)胞比例顯著減少,而中性粒細(xì)胞CD11b表達(dá)顯著升高;72h后與MI/R組相比,24h-ADSCs移植組心臟中白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞比例顯著減少,而巨噬細(xì)胞比例及CD163陽性巨噬細(xì)胞所占比例明顯上升;3)48h后與MI/R

5、組相比,24h-ADSCs移植組中性粒細(xì)胞CD163陽性率明顯升高。在體外,與ADSCs共培養(yǎng)24h后的巨噬細(xì)胞CD163陽性率明顯增高;加入早期凋亡的中性粒細(xì)胞后,與ADSCs共培養(yǎng)24h后的巨噬細(xì)胞CFSE陽性率明顯增高,CFSE+CD163+的細(xì)胞明顯增加。
  結(jié)論:1)MI/R早期炎癥反應(yīng)以中性粒細(xì)胞浸潤為主,其數(shù)量隨時間動態(tài)變化,在24h達(dá)到頂峰,即炎癥在24h開始消退;2)ADSCs移植能夠減輕缺血再灌注損傷,減少梗

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