慢性乙型病毒性肝炎患者血清IL-27水平及其臨床意義.pdf

1、目的:檢測(cè)HBV感染患者不同病程階段(包括慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)及慢加急性肝衰竭(ACLF))血清IL-27變化，分析其血清IL-27變化與IFN-γ、肝功能檢測(cè)指標(biāo)及HBV免疫學(xué)指標(biāo)等之間的關(guān)系，從而探討IL-27在CHB病情進(jìn)展中的作用，為IL-27應(yīng)用于臨床CHB病情監(jiān)測(cè)及指導(dǎo)用藥提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:
　　1、研究對(duì)象:CHB患者89例，其中輕度組(light chronic hepatitis

2、B，CHB-1)31例，中度組（moderate chronic hepatitis B，CHB-m）51例，重度組（severe chronic hepatitis B，CHB-s）7例;HBV感染相關(guān)肝硬化(livercirrhosis，LC)患者41例（代償期（compensatory liver cirrhosis，LC-c）患者12例，失代償期(decompensatory liver cirrhosis，LC-d)患者29例

3、）;HBV感染相關(guān)慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure，ACLF)患者36例;健康體檢者10例作為對(duì)照組。
　　2、生化專用試管取清晨空腹靜脈5ml，離心、收集血清后置于-80℃，其余血樣送檢驗(yàn)科進(jìn)行肝功能及免疫學(xué)檢查，主要檢測(cè)ALT、TBIL、ALB等肝功能指標(biāo)及HBV相關(guān)病毒指標(biāo)。同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time PCR)法，嚴(yán)格按試劑盒說明書要應(yīng)用Real-time

4、 PCR檢測(cè)血清中HBV-DNA水平。同時(shí)凝血功能專用試管另取5ml外周血進(jìn)行凝血酶原活動(dòng)度(prothrombin time activity, PTA)檢測(cè)，以上均由專職檢驗(yàn)人員操作。
　　3、采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）檢測(cè)，參照人IL-27、IFN-γ檢測(cè)試劑盒說明書，每孔加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的光密度值（OD值），并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)孔數(shù)值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算待檢樣品中IL-27、IFN-γ的

5、含量。
　　4、常規(guī)病理檢測(cè)患者肝臟纖維化及炎癥反應(yīng)程度:本組中有57例CHB患者進(jìn)行肝臟穿刺組織病理活檢，方法按照臨床常規(guī)流程進(jìn)行。
　　5、對(duì)血清IL-27含量與IFN-γ含量及各類患者外周血血清中肝功能檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性進(jìn)行分析。同時(shí)分析不同血清ALT含量、不同HBV-DNA復(fù)制程度、不同肝臟炎癥及纖維化程度患者外周血清中IL-27含量差異及其意義。
　　結(jié)果:
　　1、各組患者外周血血清中肝功能指標(biāo)、IL-

6、27、IFN-γ水平比較
　　不同程度CHB、LC及ACLF患者血清中ALT、AST、TBIL、IL-27、IFN-γ的水平均顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，PTA則明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)。
　　2、各組患者血清IL-27含量與血清中IFN-γ含量及肝功能各指標(biāo)相關(guān)性分析
　　CHB、LC及ACLF患者血清中IL-27含量分別與IFN-γ、肝功能指標(biāo)(ALT、TBIL、ALB)及PTA的表達(dá)水平呈明顯相關(guān)性(P

7、＜0.05)，且IL-27含量與ALT、TBIL及IFN-γ含量明顯呈正相關(guān)(P＜0.05)，而與PTA及ALB含量則明顯呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。
　　3、血清IL-27與肝組織炎癥分級(jí)的關(guān)系
　　57例行肝穿刺活檢術(shù)慢乙肝患者，血清IL-27較健康對(duì)照組患者明顯增高(P＜0.05)，IL-27值并未隨著肝臟炎癥等級(jí)升高而升高，各組之間差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　4、血清IL-27與肝組織纖維化的關(guān)系

8、r>　　行肝穿刺活檢術(shù)患者中有56例肝臟出現(xiàn)不同程度的纖維化，患者血清IL-27均較健康對(duì)照組患者明顯增高(P＜0.05)，但各組血清IL-27水平與肝臟纖維化分級(jí)無關(guān)(P＞0.05)。
　　5、血清IL-27與ACLF患者預(yù)后的關(guān)系
　　本組36例ACLF患者中，存活11例，死亡25例。存活組患者血清IL-27均值低于死亡組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　6、血清IL-27與MELD評(píng)分的關(guān)系
　　

9、將LC-c、LC-d及ACLF患者進(jìn)行MELD評(píng)分，分析血清IL-27與MELD評(píng)分的關(guān)系。結(jié)果顯示，MELD＞40組與MELD≤40組比較，IL-27含量明顯增高，組間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　7、血清IL-27與HBeAg的關(guān)系
　　本組患者中，HBeAg(+)90例，HBeAg(-)86例。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示，HBeAg陽性組與陰性組比較，血清IL-27水平差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　8

10、、血清IL-27與HBV復(fù)制的關(guān)系
　　根據(jù)HBV載量不同分為HBV-DNA＜5log10 copies/ml60例，5≤HBV-DNA≤7log10copies/ml69例，HBV-DNA＞7log10copies/ml47例。方差分析結(jié)果顯示，三組之間兩兩比較血清IL-27水平差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　1、IL-27可促進(jìn)Th1型細(xì)胞免疫應(yīng)答，增加IFN-γ的表達(dá)，同時(shí)可能是HBV感染患者