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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
研究一氧化氮(nitric oxide,NO)在七氟醚后處理減輕大鼠離體心肌缺血/再灌注自噬和凋亡中的作用。
方法:
取雄性SD大鼠建立Langendorff離體灌流模型,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為6組(n=19):假手術(shù)組(SHAM組)、單純七氟醚組(SEVO組)、缺血再灌注組(I/R組)、七氟醚后處理組(SEVOP組)、七氟醚后處理+非選擇性一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,N
2、OS)抑制劑L-NAME組(SEVOP+L組)、L-NAME組。除SHAM組、SEVO組平衡30 min持續(xù)灌注2.5 h外,余下4組平衡30 min,缺血30 min,再灌注2 h。SEVO組于第60 min時(shí)灌注3%七氟醚15 min。SEVOP組和L-NAME組于再灌注即刻分別給予3%七氟醚15 min和L-NAME(100μmol/L)60 min。SEVOP+L組于再灌注即刻同時(shí)給予相同計(jì)量的七氟醚和L-NAME。再灌注2 h
3、結(jié)束后,采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法計(jì)算心肌梗死范圍,分光光度法測(cè)心肌組織NOS活性、硝酸還原酶法測(cè)NO含量,透射電鏡觀察自噬小體形成情況,Western Blot技術(shù)檢測(cè)蛋白(Beclin1、Bcl-2和Caspase-3)表達(dá)水平。
結(jié)果:
SEVO組與SHAM組各指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與SHAM組比較,I/R組梗死范圍增加,NOS活性、NO含量下降,Bcl-2表達(dá)下調(diào),Beclin1、C
4、aspase-3表達(dá)上調(diào)(P<0.05)。
與I/R組比較,SEVOP組梗死范圍減少,NOS活性增強(qiáng),NO含量增加,Bcl-2表達(dá)上調(diào),Beclin1、Caspase-3表達(dá)下調(diào)(P<0.05)。
與SEVOP組比較,SEVOP+L組梗死范圍增加,NOS活性及NO含量下降,Bcl-2表達(dá)下調(diào),Beclin1、Caspase-3表達(dá)上調(diào)(P<0.05)。
結(jié)論:
七氟醚后處理減輕大鼠離體心肌缺血/再
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