耐堿酵母菌的分離鑒定及粘性紅圓酵母XJU-1產(chǎn)β-胡蘿卜素的研究.pdf

1、長(zhǎng)期以來(lái)耐堿性和嗜堿性一直被認(rèn)為是原核生物的特性，近年來(lái)，大量耐堿及嗜堿細(xì)菌、古細(xì)菌已從各種土壤和水體中分離得到，但對(duì)耐堿酵母菌的研究報(bào)道甚少，國(guó)外報(bào)道不到5篇，國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)對(duì)耐堿酵母菌的研究報(bào)道。新疆因地理位置特殊，決定了其獨(dú)特的資源優(yōu)勢(shì)，對(duì)耐堿酵母菌這一重要微生物資源進(jìn)行開(kāi)發(fā)研究，具有重要的理論意義和工業(yè)應(yīng)用價(jià)值。 從新疆烏魯木齊一塊鹽堿地土壤中分離得到一株耐堿紅酵母菌，它們能在pH4.0-11.5，5-50℃生長(zhǎng)，耐堿性能明

2、顯優(yōu)于已報(bào)道的菌株，對(duì)其進(jìn)行了以大亞基26SrDNA中D1/D2區(qū)的堿基序列和小亞基5.8SrDNA及兩個(gè)內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS1和ITS2)堿基序列分析為依據(jù)的分子分類(lèi)學(xué)鑒定，再結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察及生理生化特性測(cè)定，將其鑒定并命名為粘性紅圓酵母(Rhodotorulamucilaginosa)XJU-1，菌種保藏號(hào)為CGMCC.No1536。 從新疆溫泉縣一個(gè)堿性工業(yè)污水處理池中分離得到一株耐堿酵母菌，它能在pH3.5-11.0，1

3、2％NaCl，4-45℃生長(zhǎng)，通過(guò)形態(tài)觀察及生理生化特征鑒定鑒定為酵母屬，對(duì)其26SrDNA5'端D1/D2區(qū)基因序列進(jìn)行了PCR擴(kuò)增并測(cè)序，GenBank注冊(cè)號(hào)為DQ132884，同源序列分析結(jié)果表明該序列與釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)Sb4有99.8％的同源性，將其鑒定并命名為釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)XJU-2，已保藏于中國(guó)微生物菌種保藏委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC

4、)，保藏號(hào)為CGMCCNo.2.3095。 用紅酵母發(fā)酵生產(chǎn)β-胡蘿卜素，營(yíng)養(yǎng)要求簡(jiǎn)單，生長(zhǎng)周期短，產(chǎn)品安全可靠，但由于β-胡蘿卜素發(fā)酵產(chǎn)量比較低，成本較高，限制了它的應(yīng)用和推廣。因此篩選高產(chǎn)β-胡蘿卜素的紅酵母菌株是解決這一問(wèn)題的關(guān)鍵。我們研究從粘性紅圓酵母(Rhodotorulamucilaginosa)XJU-1中提取β-胡蘿卜素并對(duì)其特性加以研究。采用酸熱法對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物破壁，用丙酮∶石油醚(1∶1)萃取β-胡蘿卜素，采用G

5、B/T5009.83-2003的HPLC方法測(cè)定β-胡蘿卜素含量，以448nm波長(zhǎng)的紫外分光光度吸收值計(jì)算出色素?fù)p失率來(lái)探討β-胡蘿卜素的穩(wěn)定性。該菌株在液體發(fā)酵培養(yǎng)基中生長(zhǎng)72hβ-胡蘿卜素含量高達(dá)389.2μg/g干重，得到的β-胡蘿卜素屬純天然產(chǎn)品，沒(méi)有人工色素潛在的危害，可廣泛的應(yīng)用于食品工業(yè)等各領(lǐng)域中。有很好的開(kāi)發(fā)前景。隨后研究了紅酵母生產(chǎn)β-胡蘿卜素的最優(yōu)碳源、氮源及其濃度選擇和金屬離子對(duì)紅酵母生長(zhǎng)和β-胡蘿卜素生成的影響，