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1、為提高赤霉素GA3生產(chǎn)菌種藤倉(cāng)赤霉菌(Gibberellafujikuroi)978菌株的發(fā)酵生產(chǎn)水平,本文在以淀粉為發(fā)酵主導(dǎo)碳源的GA3發(fā)酵工藝的基礎(chǔ)上研究了豆油以不同方式對(duì)GA3發(fā)酵的影響,為提高GA3效價(jià)進(jìn)行了初步探索。 以淀粉為主導(dǎo)碳源的赤霉素GA3補(bǔ)油發(fā)酵實(shí)驗(yàn)表明,豆油的添加濃度和添加時(shí)間對(duì)GA3發(fā)酵效價(jià)的影響較大,并且在發(fā)酵的儲(chǔ)藏期赤霉菌能夠很好地利用添加豆油的情況下,添加的豆油對(duì)GA3效價(jià)的提高有幫助。淀粉發(fā)酵培養(yǎng)
2、基發(fā)酵60h添加1.0%(W/V)豆油,發(fā)酵192h,GA3效價(jià)與淀粉發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵相比,在搖瓶發(fā)酵水平上提高21%,在10L發(fā)酵罐發(fā)酵水平上提高20%。分批添加豆油可避免對(duì)發(fā)酵液溶氧能力的抑制,但豆油添加的時(shí)間和濃度也很重要,淀粉發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵60h和108h各添加0.5%(W/V)豆油,發(fā)酵192h,GA3的產(chǎn)量與淀粉發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵相比,在搖瓶發(fā)酵水平上提高26%,在10L發(fā)酵罐發(fā)酵水平上提高29%。 豆油為主導(dǎo)碳源的赤霉素
3、GA3發(fā)酵實(shí)驗(yàn)表明,豆油的濃度會(huì)對(duì)發(fā)酵液的溶氧值(DO值)產(chǎn)生影響,進(jìn)而影響到赤霉菌生物量和GA3效價(jià)。培養(yǎng)基優(yōu)化結(jié)果為:豆油濃度為6%(W/V),氮源為1.2%的花生餅粉,添加0.001mol/LMnSO4和0.1%聚乙二醇(PEG),其它成分與淀粉發(fā)酵培養(yǎng)基相同,在搖瓶發(fā)酵水平上發(fā)酵192h,GA3效價(jià)相對(duì)于淀粉發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵提高32%;在10L發(fā)酵罐發(fā)酵水平上發(fā)酵180h,效價(jià)提高30%。分批補(bǔ)加豆油的發(fā)酵實(shí)驗(yàn)表明,在合理補(bǔ)加豆油
4、的時(shí)間和濃度的條件下,會(huì)得到理想的GA3效價(jià)。以3%(W/V)豆油為發(fā)酵起始主導(dǎo)碳源,在發(fā)酵60h補(bǔ)加2%(W/V)豆油和發(fā)酵108h補(bǔ)加1%(W/V)豆油,發(fā)酵192h,GA3效價(jià)與淀粉發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵相比,搖瓶發(fā)酵水平上提高約38%。但豆油補(bǔ)加的機(jī)理有必要進(jìn)行深入的研究。 分階段提供不同主導(dǎo)碳源對(duì)赤霉素GA3發(fā)酵的影響實(shí)驗(yàn)表明,在發(fā)酵前期采用淀粉作為發(fā)酵起始碳源,同時(shí)添加適量的豆油對(duì)脂肪酶進(jìn)行誘導(dǎo),根據(jù)發(fā)酵液殘?zhí)呛椭久傅淖兓?/p>
5、來(lái)進(jìn)行豆油的補(bǔ)加,可保證赤霉菌的生物量及提高GA3的效價(jià),同時(shí)避免發(fā)酵終點(diǎn)豆油的殘留。優(yōu)化的發(fā)酵方式表明:采用4%玉米淀粉作為發(fā)酵起始主導(dǎo)碳源,還原糖濃度為22g/L左右,同時(shí)添加1%(W/V)豆油,發(fā)酵60h時(shí)補(bǔ)加4%(W/V)豆油,發(fā)酵192h,在搖瓶發(fā)酵水平,GA3效價(jià)與淀粉發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵相比提高32%,在10L發(fā)酵罐發(fā)酵水平上提高38%。在分批補(bǔ)加豆油的實(shí)驗(yàn)中,補(bǔ)加時(shí)間應(yīng)在GA3發(fā)酵的儲(chǔ)藏期時(shí)補(bǔ)加的豆油才宜于利用。發(fā)酵60h和1
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