黃色鏈霉菌T111發(fā)酵產(chǎn)物性質(zhì)及其對(duì)黃瓜菌核病菌作用方式初探.pdf

1、為進(jìn)一步了解放線菌Tlll菌株的拮抗作用方式，以黃瓜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum為指示菌測(cè)定了該菌株發(fā)酵液的抑菌活性，優(yōu)化了發(fā)酵條件，并對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行了抗菌譜測(cè)定、理化性質(zhì)分析，從而為進(jìn)一步生防應(yīng)用打下基礎(chǔ)。
　　 1、通過(guò)形態(tài)觀察、生理生化測(cè)定結(jié)合16S rDNA序列分析確定了其分類地位，結(jié)果表明，Tlll與黃色鏈霉菌Streptomyces flavus strainNBRC3359（AB18474

2、9）序列的同源性最高，初步鑒定為黃色鏈霉菌（Streptomyces flavus）。
　　 2、為明確放線菌Tlll的理化性質(zhì)，研究了其抗菌譜，及貯存時(shí)間、溫度、酸堿條件、紫外光照射等對(duì)其發(fā)酵液穩(wěn)定性的影響。結(jié)果表明，Tlll發(fā)酵液對(duì)黃瓜菌核、黃瓜蔓枯、棉花紅腐病菌等有較高的抑制活性；貯存穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性良好，4℃貯存60d抑菌活性為對(duì)照的88.3％，80℃處理60min抑菌活性為對(duì)照的90.9％；對(duì)pH值較敏感，在pH5～7

3、時(shí)活性較高；對(duì)紫外線穩(wěn)定，紫外光照射12h，其活性基本不受影響。.
　　 3、為提高Tlll發(fā)酵液的抑菌能力，采用單因素和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法對(duì)Tlll發(fā)酵培養(yǎng)基的組成及發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：可溶性淀粉5g，大豆蛋白胨5g，NaNO320g，F(xiàn)eSO42.5g，去離子水1000mL；最佳發(fā)酵條件為：發(fā)酵溫度27℃，發(fā)酵時(shí)間5d，初始pH6.0，接種量5％，裝液量75mL/250mL，搖床轉(zhuǎn)速150r·mi

4、n-1。采用優(yōu)化培養(yǎng)基及上述優(yōu)化條件培養(yǎng)的Tlll發(fā)酵液，其抑菌率穩(wěn)定在83％以上。
　　 4、初步研究了Tlll發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)黃瓜菌核病菌的作用方式，采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了其對(duì)黃瓜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum菌絲生長(zhǎng)的毒力，及其對(duì)菌絲形態(tài)、菌核形成、菌核萌發(fā)和菌體細(xì)胞膜透性的影響。結(jié)果表明，Tlll發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)黃瓜菌核病菌菌絲生長(zhǎng)的EC50值為12.5μg/mL，低于對(duì)照藥劑乙霉威及嘧霉胺；經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)物處