黃色鏈霉菌T111發(fā)酵產物性質及其對黃瓜菌核病菌作用方式初探.pdf

1、為進一步了解放線菌Tlll菌株的拮抗作用方式，以黃瓜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum為指示菌測定了該菌株發(fā)酵液的抑菌活性，優(yōu)化了發(fā)酵條件，并對發(fā)酵液進行了抗菌譜測定、理化性質分析，從而為進一步生防應用打下基礎。
　　 1、通過形態(tài)觀察、生理生化測定結合16S rDNA序列分析確定了其分類地位，結果表明，Tlll與黃色鏈霉菌Streptomyces flavus strainNBRC3359（AB18474

2、9）序列的同源性最高，初步鑒定為黃色鏈霉菌（Streptomyces flavus）。
　　 2、為明確放線菌Tlll的理化性質，研究了其抗菌譜，及貯存時間、溫度、酸堿條件、紫外光照射等對其發(fā)酵液穩(wěn)定性的影響。結果表明，Tlll發(fā)酵液對黃瓜菌核、黃瓜蔓枯、棉花紅腐病菌等有較高的抑制活性；貯存穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性良好，4℃貯存60d抑菌活性為對照的88.3％，80℃處理60min抑菌活性為對照的90.9％；對pH值較敏感，在pH5～7

3、時活性較高；對紫外線穩(wěn)定，紫外光照射12h，其活性基本不受影響。.
　　 3、為提高Tlll發(fā)酵液的抑菌能力，采用單因素和正交試驗設計法對Tlll發(fā)酵培養(yǎng)基的組成及發(fā)酵條件進行了優(yōu)化。結果表明，最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：可溶性淀粉5g，大豆蛋白胨5g，NaNO320g，F(xiàn)eSO42.5g，去離子水1000mL；最佳發(fā)酵條件為：發(fā)酵溫度27℃，發(fā)酵時間5d，初始pH6.0，接種量5％，裝液量75mL/250mL，搖床轉速150r·mi

4、n-1。采用優(yōu)化培養(yǎng)基及上述優(yōu)化條件培養(yǎng)的Tlll發(fā)酵液，其抑菌率穩(wěn)定在83％以上。
　　 4、初步研究了Tlll發(fā)酵產物對黃瓜菌核病菌的作用方式，采用菌絲生長速率法測定了其對黃瓜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum菌絲生長的毒力，及其對菌絲形態(tài)、菌核形成、菌核萌發(fā)和菌體細胞膜透性的影響。結果表明，Tlll發(fā)酵產物對黃瓜菌核病菌菌絲生長的EC50值為12.5μg/mL，低于對照藥劑乙霉威及嘧霉胺；經發(fā)酵產物處