便秘貼對功能性便秘實秘治療的臨床及實驗研究.pdf

1、便秘的危害是漸進的，不易引起醫(yī)生及患者重視，但長期頑固性便秘對人體的危害是不容忽視的。人們普遍的慣性思維認為便秘僅僅是大便干硬難出，事實上便秘與許多疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關。隨著飲食結(jié)構的改變及精神心理和社會因素的影響，便秘已嚴重影響了現(xiàn)代人的生活質(zhì)量;且在結(jié)腸癌、肝性腦病、乳腺疾病、早老性癡呆等疾病的發(fā)生中有重要作用;在急性心肌梗死、腦血管意外等癥時便秘可導致生命意外;便秘和部分肛腸疾病有密切的關系，如痔、肛裂等。因此，早期預防和合理治

2、療便秘將會大大減輕便秘帶來的嚴重后果和社會負擔。隨著現(xiàn)代生活水平的提高，人們對生活質(zhì)量的期望越來越高，對于既往常被忽視的一些功能性疾病更加重視。生活方式的改變、飲食結(jié)構的變化使得便秘發(fā)病率逐漸升高，尤以老年及經(jīng)產(chǎn)女性居多。流行病學資料顯示，從美國的幾個全國性調(diào)查數(shù)據(jù)中得出美國便秘的發(fā)病率為3％，即大約有4百萬美國人患有便秘，每年有3-4百萬人應用瀉劑輔助排便，且便秘患病率隨年齡的增大而增加。我國的流行病學資料顯示，我國發(fā)生率10％～15

3、％左右，60歲以上的老年人占發(fā)病人群的18％～23％.
　　治療便秘的藥物較多，但大多難收持久療效，且長期應用易導致藥物依賴及副作用發(fā)生機率增加。祖國醫(yī)學對于便秘的治療積累了豐富的經(jīng)驗，認為功能性便秘有虛實之分，臨床發(fā)現(xiàn)頑固性便秘以實秘為主，發(fā)病年齡趨于年輕化。導師周建華教授經(jīng)多年實踐，參詳古今，在內(nèi)治法治療便秘取得初步成效的基礎上，研發(fā)外治法，彌補長期服用瀉劑帶來的副作用。
　　功能性便秘之所以療效不盡如人意，因為現(xiàn)代醫(yī)學

4、對便秘的病因、發(fā)病機制尚未完全清楚。研究者們在不斷進行著有益的探索，認為功能性便秘患者存在結(jié)腸動力紊亂，結(jié)腸平滑肌病變，結(jié)腸神經(jīng)叢及神經(jīng)遞質(zhì)異常，結(jié)腸粘膜水通道蛋白表達異常。盡管如此，仍不能完全闡釋便秘的發(fā)病機制。隨著對ICC研究的深入，其在胃腸動力障礙性疾病中作用越來越受到重視。
　　便秘是臨床常見疾病，也是多種疾病常見的癥狀之一，可分為原發(fā)性便秘和繼發(fā)性便秘。本研究的內(nèi)容即指原發(fā)性功能性便秘，目的在于研究便秘貼治療功能性便秘之

5、實秘的治療機制。
　　原發(fā)性性功能性便秘治療困難，需長期反復用藥，長期反復應用瀉劑，可加重腸壁損害，導致便秘癥狀更加頑固。促動力藥物因可導致惡性心血管事件，亦為臨床少用。周建華教授總結(jié)多年內(nèi)治法治療功能性性便秘的經(jīng)驗，自創(chuàng)外治法（便秘貼）治療功能性便秘，臨床療效滿意。周師勤求古訓，匯通中西，并結(jié)合自己多年臨床實踐，對便秘一癥有獨到認識。便秘貼是周教授多年臨床經(jīng)驗的結(jié)晶，在其領導的肛腸科療區(qū)已廣為應用。為進一步驗證便秘貼治療功能性便

6、秘實秘的臨床療效，探討治療機理并結(jié)合當前國內(nèi)外研究進展特設計本課題。本課題主要從以下2個方面進行研究:
　　第一部分臨床研究
　　目的:驗證便秘貼治療功能性便秘實秘的臨床療效。
　　方法:本實驗研究收集入選病例80例，隨機分成2組，治療組40例，對照組40例。治療組給予便秘貼，對照組則選用麻仁軟膠囊口服（麻仁軟膠囊有效成分與便秘貼有效成分接近，治療方向一致）。療程2周，對比兩組經(jīng)藥物干預后的癥狀積分變化情況，從而進一步

7、證明便秘貼的療效更顯著。
　　結(jié)果:經(jīng)秩和檢驗，組間總體療效比較P=0.01＜0.05，有顯著性差異，故治療組療效明顯優(yōu)于對照組。組間痊愈與顯效率經(jīng)卡方檢驗比較P=0.002＜0.05，說明便秘貼治療實秘型便秘消除或改善臨床癥狀的程度高于麻仁軟膠囊。經(jīng)多個獨立樣本比較的秩和檢驗，治療組與對照組療前與療后7天中醫(yī)證候積分比較，P=0.106＞0.05，無統(tǒng)計學差異。療前與療后中醫(yī)證候積分比較P=0.000＜0.05，具有統(tǒng)計學顯著性

8、差異，說明便秘貼治療實秘降低中醫(yī)證候積分明顯優(yōu)于麻仁軟膠囊，且隨訪發(fā)現(xiàn)應用便秘貼患者，一般感覺良好，無大便溏瀉、腹部不適等副作用。
　　第二部分實驗研究
　　實驗一:實秘型功能性便秘小鼠模型復制
　　目的:復制實秘型功能性便秘小鼠模型
　　方法:實驗方法參照王朝輝、彭志輝、齊微[10]等文獻方法，造模組及各擬用藥物組小鼠皮下注射鹽酸嗎啡，2.5mg/(kg·d)，共45天，空白組注射等體積等滲鹽水共45天。造模組

9、及各擬用藥物組小鼠禁水不禁食，每日給予等量大米，連續(xù)72小時，這樣就形成了實秘型便秘的模型。在造模期間注意觀察每只小鼠的一般體征變化情況;記載小鼠的日平均糞便稱重測定:即7天測一次24小時糞便重量，同時收集各代謝籠中實驗小鼠的糞便重量，待實驗結(jié)束后，計算出每組小鼠日平均糞便稱重，最后進行統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果:空白組小鼠:精力充沛，神態(tài)正常，行動矯健，神氣依常，動作敏捷;皮毛密實，光澤亮麗，緊貼皮膚;眼睛明亮，眼珠色澤粉紅光亮;口

10、鼻唇處清潔而濕潤，色澤淡粉紅;腰脊背平直無彎曲，活動自如不受限，覓食及飲水正常。造模組小鼠禁水不禁食72小時后表現(xiàn)出精神亢奮，輕度煩躁，體重略減輕，稍有豎毛，活動少，腹部略脹滿，尿色深黃量少，鼻唇失澤發(fā)干，大便干結(jié)呈圓珠狀，或串珠狀等癥狀，符合便秘實秘的臨床特征。
　　實驗二:便秘貼對實秘型便秘模型小鼠結(jié)腸cajal間質(zhì)細胞的影響
　　目的:探討便秘貼對功能性便秘的機理
　　方法:各藥物組分別按動物體表面積換算法計算劑

11、量，灌服各組小鼠，每日1次，持續(xù)兩周。便秘貼成糊狀，常溫以10g/kg/d涂抹于脫毛處，麻仁軟膠囊組給予麻仁軟膠囊0.25g/kg/d，莫沙必利組給予莫沙必利3.0mg/kg/d。模型組及空白組不予任何藥物，兩組灌服等體積量生理鹽水，每日1次，持續(xù)兩周。最后1次給藥后，拉椎處死動物，解剖小鼠腹腔，分離大腸，各組小鼠結(jié)腸組織肉眼觀察未見差異，切取距離肛門約1cm遠端結(jié)腸腸段2段，用無菌鹽水沖洗干凈，分別置于福爾馬林液中固定及液氮罐中冷凍保

12、存待用。采用免疫組化技術及激光共聚焦顯微鏡掃描觀察各組小鼠結(jié)腸Cajal間質(zhì)細胞(Interstitial cells of Cajal ICC)的變化。
　　結(jié)果:表明慢性功能性便秘模型小鼠存在結(jié)腸ICC的異常，便秘模型小鼠結(jié)腸ICC數(shù)量明顯減少，并有形態(tài)異常，與空白組小鼠比較ICC連接網(wǎng)絡欠完整。便秘貼使用14天后小鼠結(jié)腸ICC數(shù)量有明顯升高。西藥莫沙必利對便秘模型小鼠結(jié)腸ICC有一定影響，但未見統(tǒng)計學差異，麻仁軟膠囊能夠提高

13、ICC數(shù)量，但與便秘貼比較存在明顯差異。便秘貼有效成分能夠明顯增加便秘模型小鼠結(jié)腸ICC的數(shù)量，且對ICC數(shù)量的影響存在量效關系，便秘貼對ICC數(shù)量的改善更加明顯，幾乎接近空白組小鼠結(jié)腸ICC的數(shù)量。便秘貼療效更加明顯。推測便秘貼治療便秘的機理是通過ICC完成的。
　　實驗三:便秘貼對實秘模型小鼠結(jié)腸c-kit蛋白表達的影響
　　目的:本研究擬從檢測便秘貼中有效成分干預后的便秘模型小鼠結(jié)腸組織c-kit蛋白表達情況入手，探討

14、便秘貼作用機理，從而在分子水平來闡釋其通便機制。
　　方法:取液氮冷凍保存的便秘模型小鼠結(jié)腸組織，利用western-blot技術檢測便秘貼干預后的便秘模型小鼠結(jié)腸組織c-kit蛋白表達的變化。
　　結(jié)果:經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳和硝酸纖維素膜蛋白質(zhì)印跡顯示出一條145KD的條帶，符合c-kit蛋白的分子量大小。模型組該蛋白表達明顯降低，便秘貼組蛋白表達與模型組比較有顯著提高。經(jīng)方差分析，模型組與空白組比較P＜0.01，具有顯著