鞣酸對(duì)異丙腎上腺素引起大鼠心力衰竭的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:心力衰竭（HeartFailure,HF）作為臨床中各種常見心臟疾病的惡性歸宿之一，嚴(yán)重威脅著人們的健康。目前對(duì)于心力衰竭的研究表明，防止神經(jīng)因子過度分泌、降低氧化應(yīng)激水平及抗炎癥因子分泌等已成為治療心力衰竭的新靶點(diǎn)。鞣酸（TannicAcid,TA）作為中成藥單體，其具有對(duì)抗脂質(zhì)過氧化、抗細(xì)胞凋亡、抗炎及清除機(jī)體內(nèi)羥基自由基的能力。因此，我們推測(cè)，鞣酸對(duì)心力衰竭可能具有一定的治療作用。本研究的目的是探討鞣酸對(duì)異丙腎上腺素誘導(dǎo)的心

2、力衰竭大鼠心臟保護(hù)作用及可能的作用機(jī)制。
　　方法:選用清潔級(jí)SD雄性大鼠共計(jì)50只，將大鼠隨機(jī)分成5組，即空白對(duì)照組、異丙腎上腺素模型組、卡托普利陽性藥物對(duì)照組、鞣酸低劑量和鞣酸高劑量治療組。每組各10只大鼠，并分別稱取、記錄各組大鼠體重值。其中鞣酸低劑量組及鞣酸高劑量組的大鼠，分別給予鞣酸20mg/kg/day和40mg/kg/day進(jìn)行灌胃?？ㄍ衅绽栃运幬飳?duì)照組的大鼠給予卡托普利灌胃操作，劑量為10mg/kg/day?？瞻?/p>

3、對(duì)照組和異丙腎上腺素模型組大鼠分別給予等量的生理鹽水進(jìn)行灌胃給藥。同時(shí)，異丙腎上腺素模型組、卡托普利陽性藥物對(duì)照組、鞣酸低劑量組和鞣酸高劑量組大鼠的心力衰竭模型采用背部點(diǎn)狀皮下注射異丙腎上腺素，劑量為170mg/kg/day，持續(xù)給藥4天，空白對(duì)照組注射等體積的生理鹽水。各組大鼠分別按上述給藥治療4周。
　　于末次給藥結(jié)束后，稱量各組大鼠的體重，然后用0.3％戊巴比妥鈉麻醉。經(jīng)右側(cè)的頸總動(dòng)脈插管至左心室，采用BL-420E+生物信

4、號(hào)采集系統(tǒng)分別記錄平均動(dòng)脈壓（MABP）、左室舒張末壓（LVEDP）、左室收縮壓（LVSP）、收縮期左心室內(nèi)壓上升最大變化速率（+dp/dtmax）及舒張期左心室內(nèi)壓下降最大變化速率（-dp/dtmax）。隨后取血，分離血清，以便用于試劑盒檢測(cè)血清中腦鈉肽（BNP）、內(nèi)皮素-1（ET-1）及一氧化氮（NO）水平。取大鼠心臟組織，經(jīng)4%多聚甲醛固定后，用于做蘇木素和伊紅（H&E）染色及免疫組化檢測(cè)，以便組織病理形態(tài)學(xué)的檢測(cè)。剩余的心臟組織

5、放入液氮中冷凍，采用相應(yīng)試劑盒測(cè)定心臟組織中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的活性及丙二醛（MDA）的含量，并通過WesternBlotting測(cè)定組織中凋亡蛋白（Bax及Bcl-2）、核轉(zhuǎn)錄因子P65（NF-?BP65）水平，通過免疫組化測(cè)定c-fos及c-jun水平。
　　結(jié)果：
　　1、鞣酸對(duì)SD大鼠體重的影響
　　與空白對(duì)照組大鼠相比，異丙腎上腺素模型組的大鼠體重明顯降低（P<0.0

6、5）。而鞣酸低劑量組、鞣酸高劑量組和卡托普利陽性對(duì)照組大鼠的體重結(jié)果提示，心衰大鼠給予鞣酸和卡托普利治療后，體重則明顯高于異丙腎上腺素心衰模型組（P<0.05）。
　　2、鞣酸對(duì)大鼠心肌組織病理形態(tài)學(xué)的影響
　　其中，空白對(duì)照組的大鼠心臟組織沒有出現(xiàn)明顯的組織病理形態(tài)學(xué)改變。而相比之下，異丙腎上素模型大鼠的心臟組織則出現(xiàn)了明顯的組織病理改變。光鏡下可見，異丙腎上腺素模型組心肌細(xì)胞出現(xiàn)大片纖維化區(qū)域和散在心肌細(xì)胞壞死灶，且合并

7、有心肌纖維增粗、變形、排列紊亂，心肌細(xì)胞出現(xiàn)斷裂、橫紋肌消失或溶解等病理學(xué)形態(tài)改變。與模型組相比，鞣酸組及卡托普利組纖維化區(qū)域及壞死范圍顯著減小，剩余心肌細(xì)胞形態(tài)及排列較為整齊。其中，鞣酸高劑量組大鼠心肌纖維形態(tài)及排列基本正常，無明顯腫脹、斷裂及溶解現(xiàn)象出現(xiàn)。
　　3、鞣酸對(duì)大鼠血清中BNP水平的影響
　　異丙腎上腺素模型組大鼠血清中BNP水平明顯高于空白對(duì)照組（P<0.05）。但鞣酸低劑量組、鞣酸高劑量組及卡托普利組大鼠血

8、清中BNP水平明顯降低（P<0.05）。
　　4、鞣酸對(duì)大鼠血流動(dòng)力學(xué)的影響
　　異丙腎上腺素模型組大鼠的平均動(dòng)脈壓（MABP）、左室收縮壓（LVSP）、收縮期左心室內(nèi)壓上升最大變化速率（+dp/dtmax）及舒張期左心室內(nèi)壓下降最大變化速率（-dp/dtmax）較空白對(duì)照組明顯降低（P<0.05），但左室舒張末壓（LVEDP）水平明顯高于空白對(duì)照組（P<0.05）。但給予鞣酸及卡托普利治療后，大鼠血流動(dòng)力學(xué)各指標(biāo)水平明顯趨

9、于正常（P<0.05）。
　　5、鞣酸對(duì)大鼠血清中ET-1和NO的影響
　　與空白對(duì)照組相比，異丙腎上腺素模型組大鼠的血清ET-1水平呈現(xiàn)明顯升高的現(xiàn)象（P<0.05），而NO水平則明顯下降（P<0.05）。但是，與模型組大鼠相比，在所有鞣酸低劑量組和鞣酸高劑量治療組的大鼠的血清ET-1呈現(xiàn)出明顯下降趨勢(shì)，而NO水平則表現(xiàn)出明顯的升高趨勢(shì)，并且指標(biāo)變化具有顯著性差異（P<0.05）。
　　6、鞣酸對(duì)大鼠心臟組織中SOD

10、、GSH-Px、MDA的影響
　　與空白對(duì)照組相比，異丙腎上腺素模型組的心臟組織中SOD和GSH–Px的活性明顯降低（P<0.05）。但是與異丙腎上腺素模型大鼠心臟組織相比，鞣酸和卡托普利治療組的大鼠心臟中，這兩種酶的活性的下降趨勢(shì)明顯減小（P<0.05）。此外，異丙腎上腺素模型組大鼠的心臟組織中的MDA的濃度比空白對(duì)照組明顯增高（P<0.05）。給予鞣酸及卡托普利治療后，MDA濃度明顯低于異丙腎上腺素模型組大鼠（P<0.05）。

11、
　　7、鞣酸對(duì)大鼠心肌細(xì)胞凋亡水平的影響
　　空白對(duì)照組心肌細(xì)胞的凋亡程度維持在一個(gè)較低水平。相比之下，異丙腎上腺素模型組的心肌細(xì)胞凋亡水平明顯升高，Bax/Bcl-2、NF-?B（P65）及c-fos、c-jun水平顯著升高（P<0.05）。給予鞣酸及卡托普利治療后，上述指標(biāo)水平顯著降低（P<0.05）。
　　結(jié)論：本研究結(jié)果表明鞣酸能夠起到對(duì)異丙腎上腺素引起的心衰大鼠心肌損傷的保護(hù)作用。鞣酸的這些對(duì)心衰心肌損傷的