澤黃顆粒及其拆方對實驗性糖尿病腎損傷大鼠的治療效應研究.pdf

1、目的:
　　1.驗證澤黃顆粒對高糖高脂飼料聯(lián)合STZ致DM大鼠腎損傷的療效及其機制。
　　2.探討澤黃顆粒及其拆方（活血利水組份、益氣組份）對DM大鼠腎臟AQP1和周細胞相關蛋白α-SMA表達的調節(jié)效應。
　　方法:
　　雄性SD大鼠共70只，體重為170-210g，隨機分成正常組10只，DM模型組60只。正常組喂食普通飼料;DM模型組喂食高糖高脂飼料，在高糖高脂飼料飼養(yǎng)4周后以40mg/kg體重一次性空腹腹腔注

2、射STZ，72h后檢測血糖，以連續(xù)3次空腹血糖≥16.7mmol/L，尿糖陽性，尿微量白蛋白定性測量陽性者確定為DM模型復制成功，造模成功大鼠48只，再隨機分為模型組（給予生理鹽水，1次/d，i.g.）10只、澤黃顆粒組（給予澤黃顆粒4.23g/kg，1次/d，i.g.）10只、拆方1組(給予活血利水組份1.08g/kg，1次/d，i.g.）9只、拆方2組(給予益氣組份1.8g/kg，1次/d，i.g.)9只、西藥對照組（給予鹽酸二甲雙

3、胍片0.5g/kg，1次/d，i.g.）10只。灌胃給藥8周后，用普通光鏡觀察各組大鼠腎組織病理變化，并測定各組大鼠BG、TG、TC、BUN、HbA1c、Scr及UAER指標，采用ELASA法檢測大鼠尿液中AQP1的濃度，運用免疫熒光方法檢測α-SMA在腎組織的分布情況，并采用Western-blot及實時熒光定量PCR檢測各組大鼠AQP1、α-SMA蛋白和基因在腎臟的表達水平。
　　結果:
　　1.模型組大鼠均出現(xiàn)出明顯多

4、飲、多食、多尿，一般狀況較差，體重下降，皮毛色澤暗黃，刺毛現(xiàn)象明顯，BG、TG、TC、BUN、HbA1c、Scr、UAER均明顯高于正常組大鼠(P＜0.01)。澤黃顆粒組、拆方1組、拆方2組和西藥對照組大鼠的TG、TC、BUN、HbA1c、Scr、UAER較模型組均顯著下降（P＜0.05)，其中與西藥對照組相比，澤黃顆粒組下降更明顯（P＜0.05)。澤黃顆粒組和西藥對照組大鼠BG較模型組均明顯下降(P＜0.01)，但拆方1組和拆方2組無

5、明顯變化(P＞0.05)。
　　2.普通光鏡觀察腎組織病理變化顯示，正常組大鼠腎小球的結構清晰，腎間質中未見炎癥細胞浸潤，腎小管上皮細胞排列整齊;模型組大鼠腎小球肥大，系膜區(qū)增寬，腎小球內可見大量紅細胞淤積，腎小管上皮細胞腫脹、脫落，腎間質中可見單核細胞和淋巴細胞浸潤;澤黃顆粒組大鼠腎小球內極少見紅細胞淤積，腎小管上皮細胞未見脫落，腎間質中少見炎癥細胞浸潤;拆方1組和拆方2組大鼠腎小球未見肥大，系膜區(qū)未見增寬，腎小球中可見紅細胞淤

6、積情況，腎小管上皮細胞有腫脹、脫落;西藥對照組大鼠腎小球中可見紅細胞淤積的情況，腎小管上皮細胞偶見脫落、壞死。
　　3.與模型組相比，澤黃顆粒組、拆方1組、拆方2組大鼠腎臟AQP1蛋白、mRNA表達水平均明顯升高(P＜0.05)，同時尿液AQP1濃度均顯著降低（P＜O.05)。
　　4.免疫熒光顯示，正常組大鼠α-SMA蛋白僅表達于腎組織微血管壁，而在腎小球和腎小管間質內未見表達;模型組大鼠α-SMA蛋白在腎小球（尤其腎小球

7、血管極）、腎小管、腎間質均有表達;澤黃顆粒組、拆方1組、拆方2組和西藥對照組大鼠α-SMA蛋白在腎小球、腎小管、腎間質的表達均有減少。
　　5.與模型組相比，澤黃顆粒組大鼠α-SMA蛋白、mRNA表達水平均明顯降低(P＜0.05)，拆方1組、拆方2組大鼠α-SMA mRNA表達水平也顯著降低（P＜0.05），但α-SMA蛋白表達水平無明顯變化(P＞0.05)。
　　結論:
　　1.澤黃顆粒可以降低BG，較好地緩解DM大