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文檔簡介
1、 本研究以高鹽極端環(huán)境下的土壤為研究對象，對目前已報道的土壤混合基因組提取與純化法進行比較研究，探索出了一套高效的高鹽極端環(huán)境土壤混合基因組的提取、純化法，能有效獲取大片段DNA，且DNA純度可達到進行分子操作水平的純度。以構(gòu)建大片斷的宏基因組文庫為探索高鹽極端環(huán)境中的未培養(yǎng)微生物基因資源提供技術(shù)平臺。 在構(gòu)建了宏基因組文庫的基礎(chǔ)上通過高通量的淀粉酶篩選，共篩選到十二個陽性克隆，選取其中的活性最高的編號為L14的轉(zhuǎn)化子進一步
2、研究，DNA測序后核苷酸序列比對的結(jié)果表明所獲的為一個全新的淀粉酶基因，定義該對該淀粉酶基因為amy14。對Amy14的氨基酸序列比對分析顯示，Amy14的氨基酸序列與唾液蛋白酶存在68﹪的同源性。 從Amy14淀粉酶的酶學(xué)特性分析表明，Amy14淀粉酶的最適反應(yīng)溫度是70℃，最佳反應(yīng)pH為8.0，該淀粉酶對Ca2+表現(xiàn)出一定的依賴性，其Ca2+最適濃度是1mol/L，高濃度的Ca2+對酶活起抑制作用，另外，通過Amy14淀粉酶
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