熊果酸抑制人結(jié)腸癌細胞HCT116增殖與Wnt-β-catenin信號的關(guān)系研究.pdf

1、結(jié)腸癌是常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，發(fā)病率和致死率均較高。目前對結(jié)腸癌的診斷和治療水平已有較大提高，但其治療效果及預(yù)后仍不樂觀。因此，尋找新的藥物靶點或開發(fā)新的治療藥物是目前攻克結(jié)腸癌所面臨的主要任務(wù)之一。熊果酸（Ursolic acid, UA）對多種腫瘤細胞有抗腫瘤作用，但具體機制尚不清楚。本課題主要分析熊果酸對結(jié)腸癌細胞增殖的影響及可能的分子機制。采用結(jié)晶紫染色、流式細胞術(shù)、RT-PCR、Western Blot和熒光素酶報告質(zhì)粒等實

2、驗方法，首先檢測UA對結(jié)腸癌HCT116細胞增殖及凋亡的影響。然后檢測UA對TGF-β3、p-Smad2/3的表達影響，在結(jié)腸上皮細胞及不同的結(jié)腸癌細胞中TGF-β3的內(nèi)源性表達情況，并檢測了外源性過表達或抑制TGF-β3對UA抑制結(jié)腸癌細胞HCT116增殖的影響。最后，分析UA對Wnt/β-cantenin信號的影響，并運用TGF-β3過表達重組腺病毒及TGF-β3抑制劑，分析UA抑制結(jié)腸癌細胞HCT116增殖與TGF-β3和Wnt/

3、β-cantenin信號的關(guān)系。結(jié)果表明，UA能明顯抑制HCT116細胞增殖，并能誘導(dǎo)G1期阻滯，同時促進HCT116細胞凋亡。UA降低HCT116細胞中TGF-β3及p-Smad2/3的水平。TGF-β3抑制劑能增強UA對HCT116細胞增殖抑制作用，而外源性過表達TGF-β3能減弱UA對HCT116細胞增殖的抑制作用。進一步分析發(fā)現(xiàn)，UA在 HCT116細胞中下調(diào)β-catenin水平并抑制Wnt/β-catenin信號。外源性過表