人類胚胎肌肉細胞體外自發(fā)惡性轉化細胞系抑癌基因的改變.pdf

1、間充質(zhì)干細胞體外長期培養(yǎng)可以發(fā)生自發(fā)惡性轉化,現(xiàn)機制未清,其可能與癌基因的激活、抑癌基因的失活有關。我們通過前期研究發(fā)現(xiàn)人類胚胎肌肉細胞長期培養(yǎng)可發(fā)生自發(fā)惡性轉化,并獲得6個永生化細胞系(來源于不同遺傳背景)。
　　實驗目的：
　　研究人類胚胎肌肉源性自發(fā)惡性轉化細胞系抑癌基因的改變。
　　實驗方法：
　　運用免疫組化、PCR、RT-PCR、DNA直接測序研究該類細胞系抑癌基因p16、p15、MTAP(甲硫氨酸磷

2、酸化酶)和p53、p21基因的改變.
　　實驗結果：
　　對這6個惡性轉化細胞系一些經(jīng)典抑癌基因的研究發(fā)現(xiàn):1.存在染色體9p21處的純合性片段缺失,其中包括MTAP,p16和p15;2.p53存在廣泛的DNA水平突變,對外顯子7至8序列測序發(fā)現(xiàn),其外顯子7,8突變率分別為8％和14%,突變類型皆為點突變,內(nèi)含子7突變程度更強,突變類型包括小片段缺失,插入及點突變,與現(xiàn)有公認的p53突變數(shù)據(jù)庫比對發(fā)現(xiàn)其突變模式完全不同。且所