G蛋白偶聯(lián)受體BDKRB1表達(dá)純化穩(wěn)定性與結(jié)晶性質(zhì)的研究.pdf

1、G蛋白偶聯(lián)受體(G-protein coupled receptor, GPCR)，是一類7次跨膜蛋白受體，在信號(hào)傳導(dǎo)有著的重要的作用，這決定了 G蛋白偶聯(lián)受體可以作為很好的藥物靶標(biāo)。GPCR（G-protein Coupled Receptor）作為細(xì)胞膜上的最大的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受體家族，本身有天然的不穩(wěn)定構(gòu)象的特點(diǎn)。這對(duì)于科學(xué)地研究 GPCR的結(jié)構(gòu)和功能帶來較大困難。GPCRs的蛋白結(jié)構(gòu)對(duì)其后期的各功能研究及相關(guān)藥物的研發(fā)有著至關(guān)重要的作

2、用，然而野生型 GPCR蛋白通常存在表達(dá)量低，高聚嚴(yán)重，均一性差和熱穩(wěn)定性差等不利于后期的結(jié)晶的問題。研究中我們針對(duì)緩激肽受體蛋白受體1蛋白，利用 Bac-to-Bac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)，在昆蟲細(xì)胞中篩選高表達(dá)的BDKRB1受體蛋白，并通過對(duì)蛋白的結(jié)構(gòu)進(jìn)行一系列的改造和優(yōu)化純化條件等方法分析不同方法對(duì)蛋白性質(zhì)的影響，改善蛋白在溶液中的分散狀態(tài)，提高蛋白的熱穩(wěn)定性，力圖獲得BDKRB1受體蛋白的穩(wěn)定突變體，為其結(jié)構(gòu)解析及相關(guān)藥物設(shè)計(jì)研究奠定