2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩66頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs)是最大的具有重要生物學(xué)功能的膜受體家族。人類基因組編碼大約400個(gè)非嗅覺GPCRs,這些GPCRs被認(rèn)為擁有內(nèi)源性的配基。到目前為止,大約有120個(gè)GPCRs的內(nèi)源性配基依然未被發(fā)現(xiàn),這些GPCRs被稱為孤兒GPCRs。研究發(fā)現(xiàn),蛋白質(zhì)或肽類激素能夠激活大約百分之五十的擁有已知內(nèi)源性配基的GPCRs,這些蛋白質(zhì)或肽類激素是GPCR內(nèi)源配基的最重要的組成部分。因此,我們推斷人體內(nèi)表達(dá)分泌的蛋白質(zhì)或肽類激素是孤兒

2、GPCRs配基的重要候選成員。為了鑒定這些蛋白質(zhì)和肽類激素,我們構(gòu)建了兩個(gè)主要的GPCR受體庫,并將50個(gè)克隆的人源的孤兒GPCRs在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中進(jìn)行過表達(dá)。在其中的一個(gè)受體庫中,我們將孤兒GPCRs克隆到pcDNA6載體中,然后讓這些未帶有標(biāo)簽的孤兒GPCRs在哺乳動(dòng)物細(xì)胞(如HEK293T細(xì)胞)中過表達(dá)。通過在細(xì)胞中共表達(dá)一個(gè)受GPCR下游信號(hào)通路調(diào)控的NanoLuc報(bào)告基因元件,這些蛋白質(zhì)和多肽能夠通過敏感的報(bào)告基因分析來進(jìn)行篩

3、選。在另一個(gè)受體庫中,這些孤兒GPCRs被克隆到pTRE3G載體中,然后這些C末端融合了EGFP標(biāo)簽的GPCRs在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中以一種可控的方式進(jìn)行過表達(dá)。通過使用融合了熒光探針的蛋白質(zhì)和多肽,GPCRs的配基在熒光顯微鏡下根據(jù)配基誘導(dǎo)的內(nèi)吞現(xiàn)象來進(jìn)行篩選。我們構(gòu)建的GPCR受體庫為尋找可能是潛在藥物靶點(diǎn)的孤兒GPCRs的配基提供了便利和研究基礎(chǔ)。
  在另一項(xiàng)工作中,我們用Nanoluciferase(NanoLuc)作為一個(gè)融

4、合表達(dá)標(biāo)簽提高了白介素-6(IL-6)在大腸桿菌中的可溶性表達(dá),并且最終得到具有很高的生物活力的成熟IL-6。Nanoluciferase(NanoLuc)是Promega公司在2012年研制的迄今最亮的生物發(fā)光報(bào)告分子。我們將NanoLuc融合到人白血病抑制因子(LIF)上,既提高了LIF蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)量又可以進(jìn)行各種生物發(fā)光定量分析。這暗示著NanoLuc可能是一種新的融合伴侶。為了測試NanoLuc作為融合伴侶對(duì)其他具有聚

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論