鐵調(diào)素的基因表達(dá)純化及神經(jīng)紅蛋白的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性分析.pdf

1、本文對(duì)鐵調(diào)素的基因表達(dá)純化及神經(jīng)紅蛋白的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性進(jìn)行了分析。文章分為兩個(gè)部分： 第一部分，采用基因工程的方法體外大量表達(dá)hepcidin。首先將 hepcidin與GST形成的融合基因在大腸桿菌EColi BL21(DE3)中有效表達(dá)成一個(gè)融合蛋白；利用SDS-PAGE電泳的方法對(duì)誘導(dǎo)劑濃度、誘導(dǎo)時(shí)間、誘導(dǎo)時(shí)機(jī)以及Fe<'2+>的終濃度等條件進(jìn)行了較系統(tǒng)的研究，確定了最佳的誘導(dǎo)表達(dá)條件，得到了可溶的電泳純 Hepcidin融

2、合蛋白。 第二部分，研究了NGB在陰離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)中的變性行為，并初步探討了其可能的變性機(jī)理，認(rèn)為SDS改變了NGB周圍的疏水環(huán)境，進(jìn)而引起了NGB熒光增強(qiáng)且發(fā)生藍(lán)移現(xiàn)象；紫外吸收的Soret峰從413nm移至401 nm；CD光譜表明α-螺旋含量在低濃度SDS存在下(0.8 mM)急劇降低，但其后隨著SDS濃度的增加其α-螺旋含量幾乎不再變化，這些都說(shuō)明SDS破壞了NGB的二級(jí)結(jié)構(gòu)，使其蛋白分子發(fā)生變