植物染色體DNA重要組成因子——端粒和著絲粒序列的研究.pdf

1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文植物染色體DNA重要組成因子——端粒和著絲粒序列的研究姓名：張偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師：孟金陵20050501華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2005屆碩士學(xué)位論文氨凝膠電泳的方法，我們對(duì)比了質(zhì)粒雙酶切和PCR擴(kuò)增兩種檢測(cè)方法檢測(cè)插入端粒序列長(zhǎng)度大小的可靠性。通過(guò)在30“0條件下對(duì)所得端粒克隆連續(xù)接種繼代培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)過(guò)程中端粒的復(fù)制是穩(wěn)定的。研究結(jié)果可能從方法學(xué)上，對(duì)如何將短重復(fù)序列插入到質(zhì)粒載體中、準(zhǔn)確的鑒定

2、插入的重復(fù)序列的長(zhǎng)度、判斷大腸桿菌的培養(yǎng)條件是否基本滿(mǎn)足了重復(fù)序列復(fù)制相對(duì)穩(wěn)定的需要以盡量完好的保存所獲得的高度重復(fù)序列克隆具有一定的意義本實(shí)驗(yàn)室還通過(guò)利用H#MIII酶切油菜基因組DNA后，回收特異性的180bp著絲粒衛(wèi)星序列連接到載體中的方法獲得了包含甘藍(lán)型油菜著絲粒衛(wèi)星序列的克隆。白菜基因組(從)中有兩種類(lèi)型的著絲粒衛(wèi)星家族序列，我們也有理由推論，甘藍(lán)型油菜(AACC)和芥菜型油菜(AABB)中至少也存在兩種以上的著絲粒衛(wèi)星家族序

3、列。進(jìn)一步分離和分析這些不同亞種的著絲粒衛(wèi)星家族，可以使我們更加深入的理解它們的進(jìn)化關(guān)系，或許還可以幫助我們更加有效、更加方便的選育油菜優(yōu)良品種。，蕊；一真核生物的染色體三大關(guān)鍵成份便是端粒，著絲粒、自主復(fù)制序列擁有了這三個(gè)必需的成份，人們便有可能?chē)L試著構(gòu)建新型的轉(zhuǎn)化載體——人工染色體。人工染色體可以一次性的將很多控制優(yōu)良性狀的基因方便的帶入到真核細(xì)胞中，而且沒(méi)有TDNA轉(zhuǎn)化時(shí)隨機(jī)插入容易引起的細(xì)胞中原功能基因失活的現(xiàn)象，因此是一種非常

4、優(yōu)良的載體。目前哺乳動(dòng)物和人類(lèi)的人工染色體已經(jīng)構(gòu)建成功，美國(guó)芝加哥大學(xué)Preuss和中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育研究所的程祝寬研究員等領(lǐng)導(dǎo)的課題組也分別正在構(gòu)建擬南芥和水稻的植物人工染色體。我們實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)分離到了油菜的著絲粒序列、油彩的端粒序列(即本文中分離到的植物界絕大部分植物通常具有的擬南芥TTTAC_rGG序列類(lèi)型，油菜的端粒序列也屬于該類(lèi)型)，希望能夠利用已經(jīng)獲得的甘藍(lán)型油菜著絲粒衛(wèi)星序列作為探針篩選已經(jīng)構(gòu)建好的甘藍(lán)性型抽菜的BAC庫(kù)，