aFGF對高血糖小鼠潰瘍療效及機(jī)制的研究與臨床糖尿病患者潰瘍超微結(jié)構(gòu)的觀察.pdf

1、目的：探討酸性成纖維細(xì)胞生長因子（aFGF）對高脂高糖、鏈脲佐菌素（STZ）誘導(dǎo)的高血糖小鼠潰瘍的療效及機(jī)理，剖析臨床糖尿病病人潰瘍面的超微結(jié)構(gòu)的變化。
　　方法：構(gòu)建高血糖小鼠潰瘍模型，昆明種小鼠40只，按隨機(jī)數(shù)字表抽取10只為正常對照組(喂養(yǎng)普通飼料)，其余小鼠在高脂高糖飲食的誘導(dǎo)下，四周后夜間禁食12h，空腹腹腔注射STZ溶液，正常組注射檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液，STZ注射7天后檢測，夜間禁食不禁水，小鼠尾靜脈取血，空腹血糖＞

2、16.7mmol/L造模成功，血糖穩(wěn)定一周后，每組小鼠均在背部單側(cè)制造直徑約6mm的皮膚潰瘍模型，并記為第0天。其余30只，按隨機(jī)數(shù)字表分為高血糖組（H組）、高血糖酸性成纖維細(xì)胞生長因子治療組（HF組）、高血糖+阻滯劑組（HP組），每組10只。于第3、6、9天評估各組小鼠的創(chuàng)面愈合率，HE染色觀察肉芽組織的厚度，免疫組化檢測CD34、VEGF、ERK、FGFR的表達(dá)。采用Western blot法檢測FGFR、ERK在創(chuàng)傷組織中的表達(dá)，

3、RT-PCR法檢測FGFR、VEGF的表達(dá)。選取兩個(gè)糖尿病患者潰瘍面的正常組織，戊二醛固定，做透射電鏡，觀察細(xì)胞器的變化。
　　結(jié)果：HF組的創(chuàng)面愈合率明顯高于H組(P<0.05)，且接近于正常潰瘍組織的創(chuàng)面愈合率，HP組的創(chuàng)面愈合率低于H組與HF組(P<0.05)。免疫組化中：CD34和VEGF的表達(dá)HF組高于H組，接近于C組，HP組明顯低于C組和H組(P<0.05)；ERK和FGFR的表達(dá)HF組高于H組、HP組的表達(dá)低于H組和

4、HF組(P<0.05)，ERK的變化早于FGFR的變化，有可能是PD98059阻滯了ERK的作用，F(xiàn)GFR的變化稍遲一些。蛋白印跡檢測的ERK和FGFR的情況與免疫組化檢測的這兩項(xiàng)指標(biāo)基本一致。RT-PCR檢測的FGFR和VEGF與Western Blot檢測的FGFR、免疫組化檢測的VEGF基本一致。外用酸性成纖維細(xì)胞生長因子對潰瘍的作用，隨時(shí)間變化作用增強(qiáng)，注射ERK抑制劑PD98059后，對創(chuàng)面的作用隨時(shí)間也在增強(qiáng)，抑制的作用也越

5、明顯。兩例臨床病例分析得出，其中1例粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)稍有擴(kuò)張，另1例線粒體部分膜和嵴消失或融合。
　　結(jié)論：酸性成纖維細(xì)胞生長因子促進(jìn)高血糖小鼠潰瘍的愈合，F(xiàn)GF可以促進(jìn)VEGF的表達(dá)，注射了ERK的抑制劑PD98059后，在一定程度上抑制了潰瘍面的愈合，并抑制了VEGF的表達(dá)，F(xiàn)GF的信號通路和VEGF的信號通路在ERK這條通路上重合，而且作用強(qiáng)，可能兩者的信號通路也有不同，為進(jìn)一步探討糖尿病潰瘍愈合的機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。兩個(gè)臨床病例得出