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1、多糖是中藥中一類天然高分子化合物,是維持生命正常運(yùn)轉(zhuǎn)的基本物質(zhì)之一,具有調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能、抗氧化以及抗衰老等作用,具有巨大的開發(fā)潛力。丹參(Salvia miltiorrhiza Bunge)為唇型科鼠尾草屬植物,以根及根莖入藥,為我國傳統(tǒng)的名貴中藥材。有關(guān)丹參化學(xué)成分的研究已有不少報(bào)道,但對(duì)其多糖成分的研究較少。 本論文以丹參為材料,研究了丹參多糖的提取、分離及純化工藝,采用苯酚.硫酸法測(cè)定了丹參不同部位總多糖的含量,用HPL
2、C法測(cè)定了丹參不同部位多糖的單糖組成和含量,并研究了多糖對(duì)質(zhì)粒DNA的保護(hù)作用。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下: (1)采用無水乙醇回流脫脂,熱水回流提取,提取液經(jīng)80%乙醇沉淀,即得水溶性粗多糖,粗多糖復(fù)溶于水后,以Sevage試劑法和反復(fù)凍融法相結(jié)合去除蛋白,透析去除小分子雜質(zhì),然后冷凍干燥得丹參多糖。 (2)采用苯酚.硫酸法測(cè)定丹參總多糖的含量,結(jié)果顯示,葡萄糖在0.01-0.1mg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,回歸方程為y=9.6584
3、x-0.0395(r=0.9992,n=6)。結(jié)果表明,方法精密度高,重現(xiàn)性好,可用于丹參總多糖的含量測(cè)定。 (3)以丹參的不同部位為材料,對(duì)其總多糖的含量進(jìn)行比較。結(jié)果顯示,總多糖含量根為18.66%,莖為1.20%,葉為1.14%,花為4.59%,種子為0.75%,總多糖在上述5個(gè)部位中的分布比例為24.88∶1.60∶1.52∶6.12∶1。表明不同部位樣品中總多糖含量存在較大差異。 (4)建立了HPLC同時(shí)分析8
4、種單糖的方法,其色譜條件為檢測(cè)波長:250nm;柱溫:40℃;流速:1.0mL/min;溶劑A:15%(V/V)乙腈+0.05mol/L磷酸緩沖液(KH<,2>PO<,4>-NaOH,pH6.9);溶劑B:40%(V/V)乙腈.+0.05mol/L磷酸緩沖液(KH<,2>PO<,4>-NaOH,pH6.9);梯度模式:時(shí)間梯度為:0→5→10→60min,相應(yīng)濃度梯度為10%→11.6%→14%→20%溶劑B。方法學(xué)考察結(jié)果表明,此法重
5、現(xiàn)性好,精密度高,可做為8種單糖的同時(shí)分析方法。 (5)用HPLC法分析了不同部位多糖的單糖組成,并對(duì)其所含單糖的含量和摩爾比進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果表明:丹參多糖的單糖組成和含量在不同部位中有較大差異。根、莖、葉和花四個(gè)部位多糖的單糖組成相同,含Man,Rha,GlcUA,GalUA,Glc,Gal和Ara等7種單糖。而種子中則含Man,Rha,GlctJA,GalUA,Glc,Xyl和Ara等7種單糖。 (6)通過丹參多糖水溶
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