Fe3O4納米對乳腺癌細(xì)胞毒性及逆轉(zhuǎn)耐藥的研究.pdf

1、目的：研究三種粒徑的磁性納米四氧化三鐵顆粒（Magnetic nanoparticles of Fe3O4，MgNPs-Fe3O4）對乳腺癌細(xì)胞毒性的影響，及其在逆轉(zhuǎn)乳腺癌細(xì)胞多藥耐藥中的作用，并探討其機(jī)制。
　　方法：（1）選取乳腺癌細(xì)胞MCF-7與MgNPs-Fe3O4共培養(yǎng)，采用CCK8實驗和EdU實驗檢測7nm，9nm，11nm三種粒徑、不同濃度的MgNPs-Fe3O4對MCF-7增殖的影響。然后用流式細(xì)胞術(shù)研究 MgNP

2、s-Fe3O4對 MCF-7凋亡率和細(xì)胞周期的影響。利用TEM檢測MgNPs-Fe3O4作用于MCF-7后在細(xì)胞內(nèi)的分布情況。利用谷胱甘肽含量檢測方法和活性氧含量檢測方法進(jìn)一步研究MgNPs-Fe3O4對MCF-7細(xì)胞氧化損傷的影響。利用Real-time PCR方法檢測氧化應(yīng)激相關(guān)基因的表達(dá)變化。利用Western Blot方法觀察氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)水平的改變。（2）選取乳腺癌耐藥細(xì)胞株MCF-7/ADR，分為對照組、MgNPs-F

3、e3O4組、表柔比星（EPI）組和EPI+MgNPs-Fe3O4組。利用CCK8實驗檢測乳腺癌MCF-7/ADR細(xì)胞增殖作用的影響。利用Hoechst33342法檢測對 MCF-7/ADR細(xì)胞凋亡能力的影響。Real-time PCR方法檢測耐藥基因ABCB1、ABCG2 mRNA表達(dá)水平變化，蛋白印跡法檢測耐藥蛋白P-gp、BCRP的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：（1）TEM觀察MgNPs-Fe3O4作用于MCF-7后納米顆粒均可通過內(nèi)

4、吞的方式進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用。三種粒徑的MgNPs-Fe3O4對MCF-7的增殖、凋亡和周期的影響呈濃度依賴性，但以9nm組的影響最為顯著。谷胱甘肽含量檢測和活性氧含量檢測說明了MgNPs-Fe3O4可對MCF-7細(xì)胞產(chǎn)生氧化損傷，Real-time PCR和Western Blot實驗顯示了HO-1、GCLC、GCLM基因和蛋白不同程度的表達(dá)上調(diào)。（2）20μg/mL MgNPs-Fe3O4能有效增強(qiáng) EPI殺傷MCF-7/ADR的效率

5、；與單獨用藥組相比，MgNPs-Fe3O4聯(lián)合 EPI組的耐藥基因 ABCB1、ABCG2和耐藥蛋白P-gp、BCRP表達(dá)下調(diào)。
　　結(jié)論：（1）MgNPs-Fe3O4對MCF-7可通過產(chǎn)生氧化損傷影響細(xì)胞的增殖、凋亡和細(xì)胞周期的變化，對細(xì)胞產(chǎn)生一定的毒性影響，尤其以9nm的MgNPs-Fe3O4最為顯著。（2）MgNPs-Fe3O4協(xié)同EPI可使耐藥基因ABCB1、ABCG2和耐藥蛋白P-gp、BCRP的表達(dá)下調(diào)，逆轉(zhuǎn)乳腺癌耐藥