三七總皂甙逆轉(zhuǎn)乳腺癌耐藥細(xì)胞MCF-7-ADM耐藥的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：化療在乳腺癌綜合治療中占有非常重要地位，但由于耐藥的發(fā)生，影響了化療效果，甚至導(dǎo)致化療失敗，影響病人預(yù)后。因此，尋找耐藥逆轉(zhuǎn)劑、提高化療療效是腫瘤臨床急需解決的問(wèn)題。目前有關(guān)逆轉(zhuǎn)耐藥的研究比較多，現(xiàn)已被證實(shí)具有逆轉(zhuǎn)耐藥活性的藥物有鈣通道阻滯劑、免疫調(diào)節(jié)劑、鈣調(diào)蛋白拮抗劑等，因療效欠佳、作用靶點(diǎn)單一、毒副作用大等難以應(yīng)用于臨床。中藥因具有療效確切、多靶點(diǎn)、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)，具有很大的研究?jī)r(jià)值，所以從中藥中尋找安全有效的耐藥逆轉(zhuǎn)劑是當(dāng)

2、今研究的熱點(diǎn)。中藥三七總皂甙具有鈣通道阻滯的活性，以往對(duì)三七的研究主要是作為抗凝劑治療心腦血管疾病，本實(shí)驗(yàn)主要研究三七總皂甙(PNS)是否具有逆轉(zhuǎn)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7/ADM(耐藥細(xì)胞)耐藥的作用。 方法：以四唑鹽比色法(MTT)測(cè)定三七總皂甙對(duì)MCF-7/S(敏感細(xì)胞)及MCF-7/ADM(耐藥細(xì)胞)的直接細(xì)胞毒作用；并用此法測(cè)定阿霉素(ADM)對(duì)兩種細(xì)胞的毒性作用，并計(jì)算出半數(shù)致死量(IC50)和耐藥倍數(shù)；以無(wú)細(xì)胞

3、毒性濃度的三七總皂甙作為耐藥逆轉(zhuǎn)劑，用MTT法體外藥敏感實(shí)驗(yàn)觀察其對(duì)乳腺癌多藥耐藥細(xì)胞株MCF-7/ADM的逆轉(zhuǎn)作用；用RT-PCR法分別測(cè)敏感細(xì)胞和三七總皂甙作用后的耐藥細(xì)胞表達(dá)的多藥耐藥基因MDRl的陽(yáng)性率；用WESTERN(蛋白印記)法測(cè)定敏感細(xì)胞和三七總皂甙作用后的耐藥細(xì)胞表達(dá)多藥耐藥蛋白P-gp的陽(yáng)性率。 結(jié)果：1、三七總皂甙在200ug/ml濃度以下時(shí)對(duì)兩細(xì)胞基本無(wú)毒性，為安全有效的逆轉(zhuǎn)劑量。2、阿霉素敏感細(xì)胞和耐藥

4、細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為(0.62±0.03)ug/ml和(25.03±5.37)ug/ml，耐藥倍數(shù)約為40.37倍。3、三七總皂甙能夠增強(qiáng)阿霉素(ADM)對(duì)MCF-7/ADM的細(xì)胞毒作用，三七總皂甙50、100、200ug/m1分別作用于乳腺癌耐藥細(xì)胞48h后，耐藥細(xì)胞株的IC50由原來(lái)的(25.03±5.37)ug/m1分別降至(17.87±4.27)ug/m1、(13.90±4.63)ug/ml、(11.91±4.6