腺病毒介導(dǎo)p53基因逆轉(zhuǎn)乳腺癌耐藥的實(shí)驗研究.pdf

1、目的 探討腺病毒介導(dǎo)p53基因(Ad-p53)對人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞系MCF-7/ADR的耐藥逆轉(zhuǎn)作用及對多藥耐藥基因1(mdr1)的影響。 方法 以重組腺病毒為載體，將野生型p53基轉(zhuǎn)染入具有多藥耐藥表型的，表達(dá)突變型p53基因的人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞系MCF-7/ADR。應(yīng)用臺盼藍(lán)活細(xì)胞拒染法觀察野生型p53基因作用前后細(xì)胞增殖的變化；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測p53蛋白表達(dá)的變化；應(yīng)用MTT法檢測MCF-7/AD

2、R細(xì)胞對阿霉素的耐藥性改變及耐藥逆轉(zhuǎn)倍數(shù)；采用實(shí)時熒光定量RT-PCR法檢測mdr1基因的變化。 結(jié)果 野生型p53基因轉(zhuǎn)染MCF-7/ADR細(xì)胞后能有效表達(dá)，并對細(xì)胞生長起抑制作用；野生型p53基因作用48小時后，耐藥細(xì)胞MCF-7/ADR對阿霉素的耐藥性逆轉(zhuǎn)倍數(shù)為11.6倍(P=0.001)，mdr1基因相對表達(dá)量由1.25±0.01下降至0.91±0.01(P=0.001)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論