2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、【目的】 MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系在p53基因外顯子8上具有突變位點(diǎn)。反義拯救是在突變位點(diǎn)被其相對應(yīng)反義RNA特異性封閉的同時(shí),補(bǔ)充野生型p53基因的雙重基因治療。本實(shí)驗(yàn)是在前期研究結(jié)果的基礎(chǔ)上探討針對p53外顯子8突變位點(diǎn)的反義RNA(ASp53exon8’RNA)和野生型p53基因(wt-p53)二者共同轉(zhuǎn)染MDA-MB-231細(xì)胞系后細(xì)胞周期改變及其蛋白表達(dá)情況,以及二者作用于MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系接種成

2、瘤的裸鼠后,對腫瘤生長的抑制作用,以及反義拯救聯(lián)合化療藥順鉑治療荷瘤鼠腫瘤的治療效果。 【方法】 1、以含MDA-MB-231細(xì)胞中突變p53外顯子8的反義表達(dá)載體為模板,體外轉(zhuǎn)錄制備突變p53反義RNA單鏈分子ASp53exon8’RNA; 2、在脂質(zhì)體介導(dǎo)下,將ASp53exon8’RNA和含有wt-p53的重組質(zhì)粒 pCDNA3.1-p53共同轉(zhuǎn)染MDA-MB-231細(xì)胞,流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞周期分布、We

3、sterrlblot檢測mt-p53蛋白的表達(dá)情況; 3、建立裸鼠人乳腺癌移植瘤模型: 4、摸索ASp53exon8’RNA和順鉑的給藥方式和劑量; 5、按最佳給藥劑量和方式進(jìn)行“反義拯救”雙基因治療及聯(lián)合順鉑治療的實(shí)驗(yàn)研究,包括治療效果和毒理性研究兩個(gè)內(nèi)容。游標(biāo)卡尺定期測量腫瘤的長徑和短徑并計(jì)算體積,繪制腫瘤生長曲線,計(jì)算抑瘤率,治療結(jié)束后腫瘤組織HE染色觀察腫瘤組織的變化、免疫組化測定突變型p53蛋白的阻斷情

4、況。 【結(jié)論】 1、向人乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231(含突變型p53外顯子8)中轉(zhuǎn)染野生型p53基因和針對其突變的反義RNA分子進(jìn)行反義拯救雙重基因治療,可以有效的阻滯細(xì)胞周期和抑制突變p53蛋白的表達(dá)。 2、反義拯救較單一的反義阻斷、野生型補(bǔ)充及順鉑治療組具有更明顯的治療效果; 3、反義拯救具有特異性和靶向性,僅作用于具有突變的腫瘤細(xì)胞; 4、反義拯救聯(lián)合化療藥順鉑治療乳腺癌具有相互協(xié)同促進(jìn)

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